[發(fā)明專利]一種混合水溶維生素的分析方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710042959.1
• 申請日: 2007-06-28
• 公開（公告）號: CN101334375A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 閻超;李鵬;黃曉晶;黎路;申克宇
• 申請（專利權(quán)）人: 上海通微分析技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 楊元焱

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及物質(zhì)的分析方法，尤其涉及一種混合水溶維生素的分析方法。

背景技術(shù)

混合水溶維生素包括維生素B₁、維生素B₂、維生素B₆和維生素C，傳統(tǒng)的毛細(xì)管電泳分離方法，由于受到壓力進(jìn)樣和落差進(jìn)樣等傳統(tǒng)進(jìn)樣方式的限制，定量差，實驗結(jié)果的重現(xiàn)性偏低，一般在2％-5％之間。

高精度定量毛細(xì)管電泳儀是一種新型的微量分析儀器，它采用壓力和電滲流驅(qū)動電解質(zhì)溶液通過毛細(xì)管柱。樣品以溶液狀態(tài)進(jìn)入毛細(xì)管柱，不同組份在高壓電場的作用下，以不同的速度定向遷移，先后依次通過紫外檢測器進(jìn)行檢測，根據(jù)各組分的遷移時間和響應(yīng)值進(jìn)行定性、定量分析。電泳的支持物是石英毛細(xì)管，采用納升級定量進(jìn)樣閥，可實現(xiàn)高精度定量進(jìn)樣。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供一種高精度定量毛細(xì)管電泳儀的混合水溶維生素的分析方法。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：一種混合水溶維生素的分析方法，采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀分析，所述的高精度定量毛細(xì)管電泳儀包含高精度微流液體輸送泵、微流控制裝置、進(jìn)樣閥、高壓電源、電場隔離裝置和紫外檢測器，所述的混合水溶維生素的分析方法包括以下步驟：

A、制備樣品溶液

準(zhǔn)確稱取維生素B₁、維生素B₂、維生素B₆標(biāo)準(zhǔn)品各100mg，維生素C標(biāo)準(zhǔn)品1mg置于100ml容量瓶中，用10mM硼砂溶液溶解并稀釋至刻度，作為樣品溶液；

B、儀器準(zhǔn)備

將高精度定量毛細(xì)管電泳儀各部分連接好，檢查是否漏液，保證儀器的密閉性；打開紫外檢測器電源，預(yù)熱30min；打開高精度微流液體輸送泵、高壓電源和微流控制裝置，調(diào)節(jié)電壓為15kY，泵流速為0.02ml/min；

C、進(jìn)樣分析

從進(jìn)樣閥注入樣品溶液進(jìn)行分析，并采集圖譜；

D、連續(xù)進(jìn)樣分析7次，記錄保留時間和積分面積，并計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

步驟c中所述的進(jìn)樣分析的分析條件為：

毛細(xì)管柱：內(nèi)徑150m，柱長100cm，有效柱長60cm；

流動相：10mM硼砂緩沖溶液；

檢測波長：254nm。

本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法由于采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行分析，解決了傳統(tǒng)毛細(xì)管電泳定量差的固有缺陷，四種水溶維生素達(dá)到基線分離，定性重現(xiàn)性RSD₇＜0.5％，定量重現(xiàn)性RSD₇＜1％。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的分析方法所采用的高精度定量毛細(xì)管電泳儀的結(jié)構(gòu)原理圖；

圖2是采用本發(fā)明的分析方法得到混合水溶維生素的圖譜。

具體實施方式

本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法，采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀分析，這種高精度定量毛細(xì)管電泳儀的主要結(jié)構(gòu)如圖1所示，它包括流動相貯液瓶1和2、連接管3、高精度微流液體輸送泵4和5、混合閥6、微流控制裝置7、電場隔離裝置8、定量進(jìn)樣閥9、高壓電源10、分離毛細(xì)管11、紫外檢測器12、高壓導(dǎo)線13、高壓電極14、三通15、連接管16和廢液收集瓶17。

本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法的步驟是：首先以維生素B₁、維生素B₂、維生素B₆和維生素C標(biāo)準(zhǔn)品為樣品，制備出它們的混合溶液。分別準(zhǔn)確稱取維生素B₁、維生素B₂、維生素B₆標(biāo)準(zhǔn)品各100mg、維生素C標(biāo)準(zhǔn)品1mg置于100ml容量瓶中，用10mM硼砂溶液(pH9.2)溶解并稀釋至刻度，作為樣品溶液。在該樣品溶液中，維生素B₁、維生素B₂、維生素B₆的濃度均為1.0×10^-3g/ml，維生素C的濃度為1.0×10^-5g/ml。