[發明專利]促進人皮下脂肪干細胞分化成熟的方法及其應用

無效

• 申請號: 200710039475.1
• 申請日: 2007-04-13
• 公開（公告）號: CN101058801A
• 公開（公告）日: 2007-10-24
• 發明（設計）人: 劉厚奇;張迅軼
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C12N5/08
• 分類號: C12N5/08;A61K35/12
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司
• 代理人: 丁振英

技術領域

本發明涉及干細胞及基因工程技術領域，具體涉及一種利用重組人成纖維細胞生長因子10(FGF10)表達載體作用于人皮下脂肪干細胞，使其分化成熟的方法，及其在皮膚創傷治療和整形美容中的應用。

背景技術

人胚胎干細胞(human?embryonic?stem?cells，hES)是從著床前的內細胞團(inner?cell?mass，ICM)獲得的具有多向分化潛能性，可以發育成為各種細胞的一類細胞系。因其具有多潛能性，而成為組織工程、器官移植等各項研究的重要材料來源。然而胚胎干細胞的研究和應用存在倫理問題，所以近年來對于成體干細胞的研究日益受到關注，其中脂肪組織因為來源豐富，提取方便，所以從中提取干細胞逐漸被研究者所重視。該研究大都集中于脂肪含量較多的動物，尤其對兔皮下脂肪的分離培養及誘導鑒定做了大量卓有成效的工作。近來由于吸脂手術越來越多，很多人開始從廢棄的脂肪中進行提取人脂肪干細胞的研究。Patricia?A.Zuk等人2002年在抽脂術組織中成功分離培養脂肪干細胞，并誘導分化成脂肪細胞、軟骨細胞、成骨細胞、神經細胞等三個胚層來源的細胞(Patricia?A.Zuk，et?al.Human?adipose?tissue?is?a?source?of?multipotentstem?cells.Mol?bio?of?the?cell，2002；13：4279～95)，最近更有人將其定向誘導成為心肌細胞(Lenka，et?al.Obesity?Research，2003)。所以可以將之稱為抽脂術細胞(processed?lipoaspirate，PLAs)或脂肪來源的間充質干細胞(adipose?derived?stem?cells，ADSCs)。然而吸脂術對皮下脂肪有加熱液化的操作過程，對細胞的存活和培養帶來不利。

人成纖維細胞生長因子(FGFs)是由數量眾多的成員組成的一個超家族，目前被鑒定的FGFs已有23種，其中FGF10是四肢、肺、牙齒、下頜腺以及白色脂肪組織等器官組織形成中重要的信號調節分子。基因敲除(gene?knockout，KO)技術是研究該基因功能的主要手段，近年通過制備FGF10的KO小鼠，發現FGF10廣泛參與胚胎器官組織的形成發生。在人的成體組織中，FGF10是表達于白色脂肪組織的唯一的FGF，而在白色脂肪組織中只有ADSC能在一定條件下分泌FGF10(Itoh?N，et?al.FGFs?as?multifunctional?signaling?molecules：divesity?of?structure?andfunction.Seikagaku，2001；73(7)：525～35)，并且FGF10在體內發揮作用時間短暫，半衰期僅為10小時左右(A.A.Thomson，et?al.Prostatic?growthand?development?are?regulated?by?FGF10.Development，1999；126：3693～701)。

脂肪組織的生長不僅包括脂肪細胞體積的增大，也包含了新脂肪細胞的生成，而新脂肪細胞即為白色脂肪組織中的脂肪干細胞分化而來。調控這一分化過程的轉錄調節因子和細胞因子有很多，主要有CAAT增強子結合蛋白家族(C/EBPs)中的C/EBPα、C/EBPβ和過氧化物酶體增殖物激活受體家族(PPARs)中的PPARγ等。這些轉錄調節因子共同控制著脂肪細胞的分化，其中尤以C/EBPs和PPARs的協同作用最為重要，兩者能相互激活轉錄，而在轉錄過程中這些因子作用也有先后順序，C/EBPβ在分化過程中首先得以表達，隨即能激活C/EBPα和PPARγ的表達，而C/EBPα也能誘導PPARγ的表達(Evan?D.Rosen，et?al.Transcriptional?regulation?of?adipogenesis.Gene?&?Development，2000；14：1293～307)。

干細胞在體內不同部位分化為不同組織細胞，組織微環境在調控分化方向上起了重要的作用，為多種臨床醫療拓展了新的途徑和思路。

發明內容

本發明的目的在于提供一種促進人皮下脂肪干細胞分化成熟的方法，及其在皮膚創傷治療和整形美容中的應用。