[發明專利]天然精氨酸酯酶的制備方法及其藥物組合物

無效

• 申請號: 200710037286.0
• 申請日: 2007-02-08
• 公開（公告）號: CN101067128A
• 公開（公告）日: 2007-11-07
• 發明（設計）人: 李榮秀;辛瑜;王霆
• 申請（專利權）人: 上海交通大學;上海擬生生物科技有限公司
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;A61K38/46
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 王錫麟;王桂忠

1、一種天然精氨酸酯酶的制備方法，其特征在于，具體步驟包括：

(1)用裝有三氮嗪固定的L-精氨酸分離材料的親和層析柱在pH?6.0的緩沖液條件下吸附粗蛇毒原料中的天然精氨酸酯酶，再用pH?10.3的緩沖液洗脫，收集洗脫組分得到天然精氨酸酯酶粗品；

(2)用弱陰離子離子交換層析對上述天然精氨酸酯酶粗品進行精制，在pH7.0緩沖液條件下上樣，用NaCl?0-0.3M的濃度梯度洗脫進行精制，得到天然精氨酸酯酶精制品。

2、根據權利要求1所述的天然精氨酸酯酶的制備方法，其特征是，所述的天然精氨酸酯酶精制品，其純度高于98％。

3、根據權利要求1所述的天然精氨酸酯酶的制備方法，其特征是，所述的天然精氨酸酯酶，其完整分子質量為34.07±0.20kDa、完全脫糖后的分子質量為28.01±0.20kDa、比活性大于每毫克蛋白10000降纖酶活力單位，N端氨基酸具有SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列。

4、一種含如權利要求1所述的天然精氨酸酯酶的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物，按質量百分比含有0.000083-0.129％天然精氨酸酯酶以及藥物載體或輔料99.871-99.999917％。

5、根據權利要求4所述的含天然精氨酸酯酶的藥物組合物，其特征是，所述的藥物組合物為凍干注射劑，每劑量按質量百分比含天然精氨酸酯酶0.01-0.07％，以及藥物載體或輔料99.93-99.99％；所述的藥物載體或輔料為低分子右旋糖苷、泊洛沙姆、卵磷脂、去氧膽酸鈉、海藻多糖、聚乳酸中的一種或幾種的組合。

6、根據權利要求4所述的含天然精氨酸酯酶的藥物組合物，其特征是，所述的藥物組合物為腸溶片，每劑量按質量百分比含天然精氨酸酯酶0.013-0.129％、以及藥物載體或輔料99.871-99.987％；所述的藥物載體或輔料為去氧膽酸鈉、羧甲基纖維素鹽、低取代羥丙基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮、明膠、醋酸纖維素鄰苯二甲酸酯、微晶纖維素、淀粉、交聯羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂、微粉硅膠中的一種或幾種的組合。

7、根據權利要求4所述的含天然精氨酸酯酶的藥物組合物，其特征是，所述的藥物組合物為噴霧劑，每劑量按質量百分比含天然精氨酸酯酶0.000083-0.0012％以及藥物載體或輔料99.9988-99.999917％；所述的藥物載體或輔料為去氧膽酸鈉、月桂醇硫酸鈉、芐澤7中的一種或幾種的組合。

8、根據權利要求4所述的含天然精氨酸酯酶的藥物組合物，其特征是，所述的藥物組合物為貼片制劑，每劑量按質量百分比含天然精氨酸酯酶0.0011-0.11％以及藥物載體或輔料99.89-99.9989％；所述的藥物載體或輔料為去氧膽酸鈉、羥丙基甲基纖維、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一種或幾種的組合。