[發明專利]一種檢測少兒鉛中毒遺傳易感風險的試劑盒

無效

• 申請號: 200710037176.4
• 申請日: 2007-02-06
• 公開（公告）號: CN101240326A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發明（設計）人: 馮哲民;鄒祖燁
• 申請（專利權）人: 上海主健生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及分子生物學和醫學領域，更具體的，本發明涉及一種檢測少兒鉛中毒遺傳易感風險的試劑盒，通過同時檢測與少兒鉛中毒遺傳易感風險密切相關的δ氨基-γ酮戊酸脫氫酶基因(ALAD)、基質γ-羧基谷氨酸蛋白基因(MGP)、維生素D受體基因(VDR)和X射線交錯互補修復基因1(XRCC1)的單核苷酸多態性位點基因型來評估少兒鉛中毒遺傳易感風險。

背景技術

鉛中毒是環境污染和不良生活習慣引起、易影響少年兒童健康的一類中毒。由于少年兒童處于生長發育階段，因其特有的生理特征，容易發生鉛中毒。鉛中毒會影響少年兒童的體格生長和神經精神發育。隨著我國經濟的迅速發展，環境污染及不良生活習慣引起的少年兒童健康問題也日顯嚴重和受到關注。人體對鉛吸收、代謝的程度是由環境和遺傳體質共同決定的，不同的人在相同的環境下受到鉛的毒害程度是不同的。因此，遺傳體質不同的人應對潛在的鉛中毒環境風險需要采取不同的策略。

鉛一旦進入到體內以后，首先與紅細胞結合，然后轉移到骨骼當中而沉積下來，在體內80％-90％的鉛儲存在骨骼當中，而血液中的鉛則隨血流到達身體的各個器官，如大腦、肝臟、腎臟、免疫器官等，從而造成損害，因此表現出的特征是多種多樣的。對于兒童來說，常見的癥狀主要表現在神經系統和生長發育方面：注意力不集中、多動，學習成績不好或下降。血鉛水平與智商之間存在負相關關系，血鉛水平每升高10μg/d1智商下降2-3分。有些孩子會表現出性情、行為問題，如脾氣暴躁、愛發脾氣、啃手指、逃學、曠課等。有的孩子則表現出體格生長發育受影響(身材瘦小)，鋅、鈣、鐵等微量元素缺乏。還有些表現出易患感冒、免疫力低下、腹痛、腿痛等。

已知，編碼δ氨基-γ酮戊酸脫氫酶(ALAD)、基質γ-羧基谷氨酸蛋白(MGP)、維生素D受體(VDR)和X射線交錯互補修復基因1(XRCC1)的四種基因與兒童鉛中毒有密切關系。

δ氨基-γ酮戊酸脫氫酶(ALAD)基因編碼的酶是血紅素合成的關鍵酶之一，其功能是催化兩個分子的ALA(delta-aminolevulinate)聚合成卟膽原。研究已經發現ALAD的表型和基因型在人群中分布的多態現象。Potluri等研究發現，控制ALAD遺傳性狀的基因位點位于染色體9q34，有2個等位基因(ALAD1和ALAD2)，后者是導致ALAD缺乏的基因。這兩種等位基因的不同表達組成了3種遺傳表現型：ALAD1-1、ALAD1-2和ALAD2-2。雜合子ALAD1-2的δ-ALAD活力相當于正常人的50％，而ALAD2-2的酶活力僅僅是正常人的2％。有學者報告ALAD基因還影響到鉛在體內的分布和毒性，在同樣血鉛水平下攜帶ALAD1-2和ALAD2-2基因者臏骨和腔骨中鉛水平增高，且對腎臟的毒性也高于ALAD1-1基因型。

基質γ-羧基谷氨酸蛋白(MGP)是維生素K依賴性蛋白，存在于骨骼、軟骨、心臟、腎臟和肺等臟器中。MGP具有抑制鈣離子在軟骨、血管壁和其他軟組織發生異常沉積的作用，MGP的水平越高則它抑制鈣離子異常沉積的作用越強。有研究發現，血清中MGP濃度與該基因的啟動子區(T-138C)，即rs1800802位點的多態性密切相關，在三種基因型中，CC基因型最高、CT基因型次之、TT基因型最低。鉛和鈣均為二價陽離子，它們有相同的吸收代謝途徑。由于MGP影響鈣的代謝，因此被認為能以相似的途徑影響鉛的代謝。而關聯分析研究則證明了這種推測。2003年，張文眾等為探討基質γ-羧基谷氨酸蛋白(MGP)基因多態性和血鉛水平的關系，尋找與兒童鉛中毒易感性有關的基因，測定了355名6～12歲的中國漢族兒童的血鉛水平。采用多聚酶鏈反應-限制性片段長度多態性法(PCR-RFLP)分析MGP基因T-138C位點的多態性。結果表明，在鉛污染地區TT基因型兒童的血鉛水平顯著高于CC基因型兒童(468.24μg/L.vs.430.31μg/L，P＜0.05)。結果顯示MGP基因啟動子區T-138C多態性影響生活在鉛污染環境中兒童的血鉛水平。2006年，張文眾等對345名6-12歲中國漢族兒童的研究中，再一次肯定了MGP基因T-138C位點TT基因型是兒童鉛中毒的易感基因。