[發明專利]一種達托霉素的合成方法

有效

• 申請號: 200710037006.6
• 申請日: 2007-01-31
• 公開（公告）號: CN101235080A
• 公開（公告）日: 2008-08-06
• 發明（設計）人: 徐紅巖;陸婷婷
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海有機化學研究所;吉爾生化(上海)有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/04
• 代理公司: 上海浦東良風專利代理有限責任公司
• 代理人: 張勁風

技術領域：

本發明涉及新型抗生素達托霉素(Daptomycin)的一種合成方法。特別涉及固液相結合的達托霉素合成方法。

背景技術：

近年來隨著抗生素應用的增多，細菌的耐藥性問題日益嚴重。在美國，臨床上分離到的金葡菌有95％對青霉素耐藥，50％以上對甲氧西林耐藥(FrindkinSK，Gaynes?RP.Antimicrobial?resistance?in?intensive?care?units.ClinChest?Med.1999，20(2)：303-316)；在日本，耐甲氧西林金葡菌(MRSA)在皮膚感染中的比例逐年上升(Nishijima?S.The?incidence?of?isolation?ofmethicillin-resistant?Staphylococus?aureus(MRSA)strains?from?skininfections?during?the?past?three?years.J?Dermatil，1993，20(4)：193-197)。盡管萬古霉素常常被認為是抵抗革蘭陽性菌感染的最后防線，但這道防線并非牢不可破，20世紀80年代以來，萬古霉素耐藥菌株有增長趨勢，包括耐萬古霉素金葡菌和腸球菌(The?centers?for?Disease?Control?and?Prevention.Staphylococus?aureus?with?reduced?sueceptibility?to?vancomycin-UnitedStates?1997.JAMA，1997，278(11)：891-892)。

革蘭陽性菌是皮膚感染中很常見的致病菌，隨著MRSA對萬古霉素的敏感性下降，作用機制不同于萬古霉素的抗生素顯得極其重要。2003年9月，美國FDA批準注射用Daptomycin(商品名cubicin)用于治療復雜性皮膚及皮膚軟組織感染(cSSSIs)，包括較大的膿腫，術后切口感染和感染性潰瘍，特別是由金葡菌、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌似馬亞種(Streptococcus?dysgalactiaesubspecies?equisimilis)以及耐萬古霉素糞腸球菌引起的感染(Cubicin[packageinsert].Lexington，Mass：Cubist?Pharmaceuticals，Inc.；2003)。

Daptomycin最初由Lily公司開發，于1994年轉讓給C?u?b?i?s?t制藥公司，Daptomycin的整個開發時間長達22年之久，是具有著獨特抗菌特性的環脂肽類抗生素。獨特的作用機制使得細菌對Daptomycin產生耐藥性可能會比較困難。目前，Daptomycin是由玫孢鏈霉菌(Streptomyces?roseosporus)發酵制得，由于專利保護等各種原因，玫孢鏈霉菌不易得。

發明內容：

本發明的目的是提供一種Daptomycin的合成方法，通過固液相結合，首次人工合成Daptomycin。主要解決現有以玫孢鏈霉菌作為原料合成成本過高的技術問題。

本發明的方法包括如下步驟：

以2-氯三苯甲基氯樹脂為起始原料，按照固相合成的方法依次連接具有保護基團的氨基酸，其中Fmoc-AA、DIC、HOBT三者間重量比為1∶1∶1，Fmoc-AA縮合過量2～5倍，獲得保護十肽樹脂，其間依次脫去Fmoc-保護基團，每一步連接氨基酸縮合都經過kaiser?test檢測，如反應呈陽性則重復接氨基酸。同樣的固相方法連接正癸酸，至kaiser?test檢測陰性，無需脫去Fmoc-保護基團步驟。通過酯化的步驟連接下一個氨基酸，Fmoc-AA、DIC、DMAP三者間重量比為3∶3∶1，Fmoc-AA縮合過量1～2倍，一次反應時間為2～4h，連續反應兩次，反應結束無需kaiser?test檢測，直接脫去Fmoc-保護基團。同樣的固相方法連接剩余的兩個氨基酸，并依次脫去Fmoc-保護基團。

用1～2％TFA或CH₂Cl₂溶液將全保護肽從樹脂上切下，處理切割液濃縮至干，加入乙醚析出固體，干燥。

液相環化時，需添加環化劑：PyBOP、HOAT，全保護多肽∶PyBOP∶HOAT三者間重量比為1∶2∶2，全保護多肽的濃度為10^-3～10^-4mol/L，有機溶劑為DMF，CH₂Cl₂或THF中的一種，反應過夜。