[發(fā)明專利]一種從生物組織樣品中分離RNA的試劑及其從生物組織樣品中分離提取RNA的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710035694.2 | 申請日： | 2007-09-07 |
| 公開（公告）號： | CN101381764A | 公開（公告）日： | 2009-03-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 易銀沙 | 申請（專利權(quán)）人： | 長沙贏潤生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C07H21/04;C07H1/08 |
| 代理公司： | 長沙正奇專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 | 代理人： | 盧 宏 |
| 地址： | 410013湖南省長*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物 組織 樣品 分離 rna 試劑 及其 提取 方法 | ||
1、一種從生物組織樣品中分離RNA的試劑，包括RNA抑制劑，去垢劑，pH調(diào)節(jié)劑， 其特征在于還加入了聚乙烯吡咯烷酮，其濃度為1—3％(m/V)；上述溶液中再 加入等體積的酸性水飽和苯酚和1/5體積的2M乙酸鈉混勻；pH為3.2—3.8。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離RNA的試劑，其特征在于RNA抑制劑為異硫氰酸胍， 加入苯酚和乙酸鈉之前的濃度為4M。
3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離RNA的試劑，其特征在于加入苯酚和乙酸鈉之前的 去垢劑十二烷基肌酸鈉和十二烷基硫酸鈉濃度分別為2％(m/V)和0.1％(m/V)。
4、根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的分離RNA的試劑，其特征在于加入苯酚和乙酸 鈉之前的聚乙烯吡咯烷酮濃度為2％。
5、根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的分離RNA的試劑，其特征在于pH調(diào)節(jié)劑為檸 檬酸三鈉、乙酸鈉、冰醋酸，其濃度分別為0.75M、2M，適量冰醋酸。
6、一種用權(quán)利要求1至5之一所述的從生物組織樣品中分離RNA試劑的提取RNA 的方法，包括如下步驟：
(1)用分離RNA試劑預(yù)處理動物或植物組織；
(2)加入萃取劑萃取；
(3)水相分離后再萃取；
(4)分離后得到RNA沉淀；
(5)清洗后備用；
其特征在于在上述第(1)步中，按每50ml變性液加入14.4mol/L的β-巰基 乙醇0.36ml的劑量加入；第(3)步中采用異丙醇和高鹽的混合液萃取的。
7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的提取RNA的方法，其特征在于所述的高鹽為0.8M檸檬 酸鈉和1.2MNaCl。
8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的提取RNA的方法，其特征在于所述異丙醇和高鹽為等比 例混合的。
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