[發(fā)明專利]鑒別尖頭蟲草的特征性核苷酸序列和方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710032876.4
• 申請日: 2007-12-26
• 公開（公告）號: CN101230380A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王磊;章衛(wèi)民;陶美華;李浩華;潘清靈
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省微生物研究所
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q1/68;C12N15/31;C07H21/04;C12R1/645
• 代理公司: 廣州科粵專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 余炳和

1.一種用于鑒別尖頭蟲草Cordyceps?sphecocephala的特征性核苷酸序列，其特征是該序列是來源于尖頭蟲草核糖體rRNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)以及5.8S?rRNA基因的核苷酸序列，具體序列為：

CAGAGAGTGA?AAACTCCCTA?ACCCACTGTG?ACCTATACCT?ATATATGCCT?CGGCAGGCTC

TGTAAAGAGA?CTGCCAAAGG?AACCTAAACT?CTTGTTTTTT?ATATAACTAG?TCTTCTGAGT

GATTTTTATA?AATATATAAA?AACTTTTAGC?AACGGATCTC?TTGGCTCTAG?CATCGATGAA

GAACGCAGCA?AAATGCGATA?AGTAATGCGA?ATTGCAGATT?TTAGTGAGTC?ATCGAGTTTT

TGAACGCATA?TTGCGCCTGC?TGGCTATTCT?AGCAGGCATG?CCTGTCCGAA?CGTCATTTAC

AGTACTAAAG?ACCCTATATG?GTCTTTCTGT?TGGAGGCTGG?CTCTTAGCGG?CCACCTCTTA

AATTTAGTAG?CGGCGGTTGC?TTTTAATTTC?CCCTGCAAAG?TAGATTTTTT?ACTTGCCATG

TTGGAAGACT?AGCAACCCCC?TATAAACAAC?CTCTTTCTCT?CTA

2.一種以權(quán)利要求1的核苷酸序列為模板而設(shè)計(jì)的用于鑒別尖頭蟲草的專一性核酸分子探針，其特征是其核苷酸序列為：

Probe?I：5’-CTCCCTAACCCACTGTGAC-3’及Probe?II：5’-AAGAGGTGGCCGCTAAGAG-3’。

3.一種鑒別尖頭蟲草的試劑盒，其特征是包括兩個權(quán)利要求2所述核苷酸分子探針，一對蟲草屬核糖體rRNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)通用引物，以及DNA提取試劑；所述的蟲草屬核糖體rRNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)通用引物是CorF：5’-CGTTGGTGAACCAGCGGAGGGAT-3’及CorR：5’-TTGCCGCTTCACTCGCCGTTACT-3’：所述的DNA提取試劑為尿素提取液，其成分為SDS?1.5％，尿素7mol/L，Tris-HCl?pH8.0?0.05mol/L，NaCl0.5mol/L。

4.一種鑒別尖頭蟲草的方法，其特征是采用權(quán)利要求2所述的核苷酸分子探針，通過核酸雜交的方式鑒定尖頭蟲草，具體步驟按照常規(guī)的分子生物學(xué)方法進(jìn)行。

5.一種鑒別尖頭蟲草的方法，其特征是采用權(quán)利要求2所述的核苷酸分子作為PCR引物，利用PCR方法鑒定尖頭蟲草，具體步驟按照常規(guī)PCR方法進(jìn)行。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于還包括利用權(quán)利要求3所述的引物CorF和CorR作為PCR引物進(jìn)行陽性對照實(shí)驗(yàn)的方法。