[發明專利]用清潔方法從喜樹果中提取白樺脂酸等有效成分

無效

• 申請號: 200710031330.7
• 申請日: 2007-11-09
• 公開（公告）號: CN101220036A
• 公開（公告）日: 2008-07-16
• 發明（設計）人: 劉展眉;何潔萍;鐘雪蓮
• 申請（專利權）人: 仲愷農業技術學院
• 主分類號: C07D491/22
• 分類號: C07D491/22;C07J53/00;A61K36/185
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明涉及一種植物有效成分的提取方法，具體涉及一種從喜樹果中提取白樺脂酸、羥基喜樹堿和喜樹堿的方法。

背景技術

白樺脂酸是一種三萜類化合物，具有抗腫瘤細胞增長的作用，并且在抗艾滋病方面還有許多新的作用機制，這使白樺脂酸成為很有開發前景的藥物，引起了人們的廣泛關注。Franoise等發現一些新的樺木酸的X-氨基鏈烷酸衍生物具有抗艾滋病的作用，它可以抑制在CEM4和MT-4細胞中的HIV-1發生細胞病變，并且不會影響到HIV-1逆轉錄酶或蛋白酶的活性，這是目前所發現的其他抗艾滋病藥物不具備的藥理活性，因此具有重要意義。

目前白樺脂酸的制備方法主要有三個途徑：1、直接提取法。其中Carcache?Blanco?Ziziphusspina等是目前此途徑的主要的代表，主要是從其他植物的樹葉樹枝中提取，原料消耗量大，成本高，所得到的白樺脂酸雜質含量會比較高，且不易除去。2、一步合成法。一步合成法是將樺木醇的提取和樺木酸的制備同步進行，它通過將植物浸軟而使提取和轉化在一步內完成，可以用氯仿、二氯甲烷、二乙基醚、四氫呋喃、丙酮、吡啶和DMF等有機溶劑來提取樺木醇，同時將硝酸鐵、硝酸銅、硝酸鉻、硝酸鋅等氧化劑附著在硅膠、氧化鋁、膠嶺石K-10等固體載體上對提取物進行氧化，最后得到白樺脂酸。此法所制得的混合物產品雜質的種類和含量很多，給分離純化帶來困難，從而導致產率下降。3、半合成法。這種方法是從植物中提取出樺木醇，然后由樺木醇經過一系列化學反應制得樺木酸。由于樺木醇在植物中的含量比樺木酸高，并且經過化學合成的方法制得的樺木酸產率較高，分離提純也比較容易，所以這種方法得到廣泛的應用。但這種方法反應路線較長，反應條件苛刻，有異構體的產生，但路線較長，不適于大規模生產。

喜樹(Camptotheca?acuminate?Decaisne，簡稱CPT)，珙桐科(Nyssaceae)喜樹屬(Camptotheca)多年生植物，落葉大喬木。1966年美國的Monroe?E.wall從喜樹的皮中分離出喜樹堿，經腫瘤試驗證明這種色氨酸一萜烯類生物堿具有抗癌活性，從而引起人們的廣泛關注。喜樹果中已經發現有20多種有特殊藥效的化合物，其中就包括有白樺脂酸。

綜上所述，目前提取白樺脂酸及喜樹堿的方法中所使用的試劑大多數都是毒性較大的藥品，如氯仿，石油醚，甲醇等，其過程繁瑣，設備要求高，生產成本高。而從喜樹果中采用清潔的方法提取白樺脂酸的技術未見報道，尤其是能同時分離提取喜樹堿，羥基喜樹堿等有效成分的方法，如果能實現這種方法，對于白樺脂酸、喜樹堿和羥基喜樹堿的研究有著重要的意義，對于充分利用我國喜樹資源也有著重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種用清潔方法從喜樹果中提取有效成分白樺脂酸、并且能同時分離得到喜樹堿、羥基喜樹堿等有效成分的方法。

本發明的技術方案是提供一種用清潔方法從喜樹果中提取白樺脂酸等有效成分的方法，以喜樹果為原料，利用聚酰胺柱層析和乙醇洗脫的方法提取白樺脂酸、喜樹堿和羥基喜樹堿。

所述方法包括以下步驟：

(1)喜樹果粉碎、用工業乙醇浸泡、過濾得到的澄清浸出液；

(2)濃縮澄清浸出液，避光低溫保存；

(3)聚酰胺柱吸附；

(4)滴入解吸液解吸，分段收集過柱液，重結晶。

步驟(1)所述的用工業乙醇浸泡是用工業乙醇浸泡過面，浸泡5天。

步驟(2)所述濃縮采用旋轉蒸發器對浸出液進行濃縮。

步驟(3)所述聚酰胺柱吸附是取大約5ml濃縮液上聚酰胺柱，緩慢加入使其充分滲透進入聚酰胺柱中，液面與聚酰胺齊平。

所述聚酰胺柱采用濕法裝柱，是取250ml的聚酰胺置于500ml的大燒杯中，加入95％的優質工業乙醇至300ml，在電熱套中煮沸半小時后取出，離心除去剩余的乙醇，再次加入95％的優質工業乙醇至300ml再煮沸半小時，離心除去剩余乙醇裝入層析柱。

步驟(4)所述滴入解吸液是逐滴加入解吸液，濃縮液被聚酰胺充分吸收后，增大加入量，最后解吸液的用量約為3倍床體積。

所述解吸液是60％的乙醇水溶液。

步驟(4)所述分段收集過柱液是采用三角瓶分5段依次收集并編號，每瓶收集約50mL。

本發明的有益效果是：