[發(fā)明專利]轉(zhuǎn)基因陰溝腸桿菌GEI－a及其構(gòu)建方法和用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710029850.4 | 申請日： | 2007-08-23 |
| 公開（公告）號： | CN101144067A | 公開（公告）日： | 2008-03-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 韓日疇;林惠嬌;丘雪紅;顏珣 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣東省昆蟲研究所 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/29;A01N63/02;A01P7/04 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利代理有限責(zé)任公司 | 代理人： | 余炳和 |
| 地址： | 510260廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 轉(zhuǎn)基因 陰溝 桿菌 gei 及其 構(gòu)建 方法 用途 | ||
1.一種轉(zhuǎn)基因陰溝腸桿菌(Enterobacter?cloacae)GEI-a，其特征是：該菌株是利用Tn5轉(zhuǎn)座子將大豆絲氨酸蛋白酶抑制劑基因插入到陰溝腸桿菌的基因組DNA中，用于表達(dá)抑制昆蟲腸道胰蛋白酶的工程菌，該菌株保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，編號為CCTCC?M207071。
2.一種權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因陰溝腸桿菌GEI-a的構(gòu)建方法，其特征包括下列步驟：
(1)提取大豆Glycine?max?L種子的總RNA，反轉(zhuǎn)錄克隆絲氨酸蛋白酶抑制劑Tia基因；
(2)利用pET-32a(+)質(zhì)粒，于大腸桿菌BL21(DE3)中原核表達(dá)所克隆基因；
(3)利用微轉(zhuǎn)座子載體pMini-Tn5，將Tia基因置入轉(zhuǎn)座單位里，構(gòu)建“自殺性”工程質(zhì)粒pMini-Tn5-Tia；
(4)將構(gòu)建的工程質(zhì)粒pMini-Tn5-Tia導(dǎo)入陰溝腸桿菌中；
(5)測定Tia基因整合到腸道細(xì)菌陰溝腸桿菌基因組DNA上，獲得表達(dá)Tia蛋白的工程菌，即得到轉(zhuǎn)基因陰溝腸桿菌GEI-a。
3.權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因陰溝腸桿菌GEI-a作為制備殺滅入侵紅火蟻誘餌藥劑的應(yīng)用。
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