[發明專利]葡聚糖單克隆抗體的制備方法無效
| 申請號： | 200710029558.2 | 申請日： | 2007-08-03 |
| 公開（公告）號： | CN101139395A | 公開（公告）日： | 2008-03-12 |
| 發明（設計）人： | 梁達奉;戚榮;陳海寧;郭劍雄;余構彬 | 申請（專利權）人： | 廣州甘蔗糖業研究所 |
| 主分類號： | C07K16/18 | 分類號： | C07K16/18;C12N5/18 |
| 代理公司： | 廣州市紅荔專利代理有限公司 | 代理人： | 唐弟 |
| 地址： | 510316廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 聚糖 單克隆抗體 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.葡聚糖單克隆抗體的制備方法，其包括如下步驟：
A.抗原選擇及其偶聯，利用載體偶聯技術和免疫方案，選擇鑰孔戚血紅蛋白和牛血清白蛋白分別與葡聚糖偶聯得到抗原；
B.動物免疫和試血，選擇4-8周齡雌性BALB/c小鼠，取步驟A得到的抗原進行免疫試驗，然后分離血清，用間接ELISA法測定小鼠血清中抗體效價；
C.細胞融合與培養，用RPMI?1640-10％FCS培養液培養免疫小鼠骨髓瘤細胞SP2/0，并與免疫小鼠分離出的脾細胞混合，在45％PEG介導下進行細胞融合，將細胞混懸在RPMI1640-20％FCS中，加入培養板培養；
D.雜交瘤細胞的篩選，取過程C的培養板中雜交瘤細胞上清，用間接ELISA方法檢測上清中抗體；
E.雜交瘤細胞的克隆化，取陽性孔雜交瘤細胞，用有限稀釋法進行克隆化，共進行2輪克隆化，最終得到雜交瘤細胞株；
F.雜交瘤腹水的制備，將培養的雜交瘤細胞注入Pristane處理過的小鼠腹腔，獲小鼠腹水。
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