[發(fā)明專利]一種陳香茶菌種的提取及培養(yǎng)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710029464.5
• 申請(qǐng)日: 2007-07-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101121921A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅一帆;許旋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;A23F3/10
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 禹小明

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及茶葉微生物領(lǐng)域，具體涉及一種陳香茶菌種的提取與培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

陳香茶是廣東的特色茶之一，陳香茶通常采用嶺頭單樅茶為原料，經(jīng)前處理、發(fā)酵、循環(huán)渥堆、渥堆后處理、壓餅成型、干燥等工序加工而成，其中循環(huán)渥堆是陳香茶加工中一道最關(guān)鍵的工序，對(duì)陳香茶品質(zhì)的形成起著重要的作用。渥堆就是將經(jīng)前處理后的茶葉堆放在一起，用布密封好，在一定濕度的條件堆放一段時(shí)間，讓茶葉通過(guò)溫度的物理作用產(chǎn)生生物、化學(xué)作用，從而使陳香茶的特征成分發(fā)生變化，達(dá)到滋味醇和、香氣純正、湯色黃紅明亮的陳香茶品質(zhì)特征。

目前陳香茶加工，一是采取在自然條件下自然陳放幾年或幾十年，茶葉通過(guò)慢發(fā)酵氧化而形成陳香茶，發(fā)酵速度非常慢，茶葉品質(zhì)需要漫長(zhǎng)的時(shí)間才會(huì)提高，而且還會(huì)受存放條件的溫度、濕度和通風(fēng)程度的影響，造成有些茶葉經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間存放而變質(zhì)。二是采取渥堆發(fā)酵，通過(guò)增加其渥堆時(shí)的溫度、濕度來(lái)發(fā)酵，使茶葉快速轉(zhuǎn)化為陳香茶，這種方法的發(fā)酵雖然較快，但這種只靠溫度和濕度來(lái)控制茶葉氧化的方法，所得的陳香茶通常存在香味不夠濃郁、滋味不夠甘醇，品質(zhì)不夠高等缺點(diǎn)。

陳香茶的加工過(guò)程中，循環(huán)渥堆的作用主要是酶、微生物和濕與熱等三大作用，貫穿于整個(gè)加工過(guò)程，其中微生物的作用對(duì)陳香茶的品質(zhì)的影響最大，它通過(guò)生化動(dòng)力(胞外酶)、物化動(dòng)力(微生物熱)以及微生物自身代謝的綜合作用，形成了陳香茶色、香、味的品質(zhì)風(fēng)味，故而可利用微生物菌種加快渥堆的時(shí)序，同時(shí)又能使得制備過(guò)程中有效控制陳香茶的獨(dú)特品性。渥堆自身可以產(chǎn)生由多種菌種組成微生物，但渥堆過(guò)程中產(chǎn)生的微生物的數(shù)量不多，不能起到渥堆應(yīng)有的作用，甚至由于渥堆條件的變化，微生物數(shù)量變化不定，其菌種的組成比例也變化不定，造成陳香茶加工過(guò)程的品質(zhì)不穩(wěn)定，甚至嚴(yán)重影響陳香茶成品的品質(zhì)、風(fēng)味等。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有陳香茶加工過(guò)程中存在的問(wèn)題，提供一種從陳香茶渥堆過(guò)程提取和培養(yǎng)陳香茶菌種的方法。以備有效制備陳香茶所用。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，采用的技術(shù)方案如下：

一種陳香茶菌種的提取及培養(yǎng)方法，包括提取及培養(yǎng)兩道工序，所述提取工序?yàn)樘崛〔枞~原料在自然發(fā)酵過(guò)程中生長(zhǎng)的微生物，所述培養(yǎng)工序采用培養(yǎng)基對(duì)所提取的微生物進(jìn)行培養(yǎng)，并制作成菌種。

所述茶葉原料為以一梢駐芽中大開(kāi)面二、三葉的嶺頭單樅茶鮮葉按綠茶制造工藝制備得綠茶，再于85～90℃加熱40～50分鐘，殺死殘留在茶葉上的微生物。

本發(fā)明所述提取工序具體細(xì)化如下：

將經(jīng)茶葉原料放入一個(gè)密封的容器中，加無(wú)菌水，使茶葉含水量為25～30％，在36～38℃下，發(fā)酵6～8天，直至茶葉表面長(zhǎng)滿微生物；

將表面長(zhǎng)滿微生物的茶葉取出，放入生理鹽水中，振蕩150～180分鐘，讓茶葉上的微生物轉(zhuǎn)移到溶液中，得到陳香茶菌溶液。

所述提取工序還同時(shí)將表面長(zhǎng)滿微生物的部分茶葉取出，于90～95℃干燥60～70分鐘，以供制備茶湯溶液所用。

本發(fā)明所述培養(yǎng)工序具體細(xì)化如下：

培養(yǎng)基的制備：按牛肉膏0.75～0.80g，蛋白胨1.5～2.0g，氯化鈉0.75～0.80g，瓊脂3.0～3.5g，茶湯溶液150～160ml，pH＝7.5～7.6組成的培養(yǎng)基配方配制；

陳香茶菌的培養(yǎng)：將適量陳香茶菌溶液緩緩注入盛有培養(yǎng)基的平板中，搖勻，密封置于36～38℃條件下暗培養(yǎng)，4～5天后菌落長(zhǎng)滿整個(gè)平板，得到用于陳香茶制備的菌種。

在制備培養(yǎng)基時(shí)還添加重量比0.2％的磷酸二氫鉀，以對(duì)培養(yǎng)基pH值的變化能起緩沖作用，防止菌種在保存過(guò)程中積累過(guò)多的酸。

培養(yǎng)工序所需的茶湯溶液的制備過(guò)程為將干燥過(guò)的茶葉30～40g，放入1000ml的沸水中，在95℃中浸泡40～50分鐘，每隔10分鐘振蕩搖動(dòng)一次，冷卻后過(guò)濾，得到的濾液作為制備培養(yǎng)基所用。

采用上述方案制得陳香茶菌種后，為了得到純正的菌種，還包括菌種純化工序，所述菌種純化工序挑取已制得的陳香茶菌種各菌落的少量菌絲體，接種在培養(yǎng)基平板上，菌絲體在36～38℃條件下生長(zhǎng)7～8天后，根據(jù)長(zhǎng)出的各菌落特點(diǎn)進(jìn)行篩選和純化，如此反復(fù)，直至菌落的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)特征均表現(xiàn)一致時(shí)視為單一菌種的菌落。

在菌種純化工序后，還進(jìn)行接種工序，所述接種工序選擇單一菌落接入培養(yǎng)基平板中，在36～38℃條件下培養(yǎng)7～8天，按此種方法進(jìn)行多次純化培養(yǎng)得到大量的純化菌株。