[發明專利]一種用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝

有效

• 申請號: 200710028854.0
• 申請日: 2007-06-27
• 公開（公告）號: CN101113431A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發明（設計）人: 肖成祖;楊琴;李智;黃小樂;梁倩茹;陳小飛;鄭敦武;陳曉銘
• 申請（專利權）人: 廣州銘康生物工程有限公司
• 主分類號: C12N5/06
• 分類號: C12N5/06
• 代理公司: 廣州知友專利商標代理有限公司
• 代理人: 李海波

1.一種用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于該工藝包括以下步驟：(1)動物細胞在無血清培養基的攪拌培養中馴化；(2)動物細胞在無血清培養基的培養中初步結團；(3)動物細胞在反應罐中用超聲-沉降雙結合灌流系統進一步結團和進行灌流培養；(4)不定期抽去部分動物細胞，使罐內動物細胞保持合適的高密度，并直接用以擴大生產。

2.根據權利要求1所述的用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于：所述的步驟(1)中動物細胞需在無血清培養基的攪拌培養下進行馴化，馴化過程是將培養基中血清濃度從5％逐漸下降至0％。

3.根據權利要求1所述的用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于：所述的步驟(2)中動物細胞在進入反應罐前，需在方瓶、轉瓶和攪拌瓶內進行初步結團，結團靠細胞在無血清培養基中自然結團。

4.根據權利要求1所述的用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于：所述的步驟(3)中的超聲-沉降雙結合灌流系統由超聲-沉降二合一灌流柱、可正反轉的蠕動泵、可定時和定向地控制蠕動泵轉動的自動控制器以及控制超聲波發生功率和時間的超聲波控制器組成。

5.根據權利要求4所述的用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于：所述的蠕動泵包括抽液蠕動泵和進液蠕動泵，抽液蠕動泵連接有收液罐，進液蠕動泵連接有貯液罐；所述的超聲-沉降二合一灌流柱置于反應罐中。

6.根據權利要求5所述的用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于：所述的超聲-沉降二合一灌流柱由超聲室和沉降柱組成，超聲室外面設有外套，外套的頂部和側面設有壓縮空氣進口和壓縮空氣出口，側面設有接線與超聲波控制器連接，超聲室頂部設有抽液管，抽液管與抽液蠕動泵相連，超聲室的下部設有下管；沉降柱的頂部設有小管，側面設有接口，接口通過軟管與超聲室的下管連接。

7.根據權利要求1所述的用于動物細胞無血清結團灌流培養的工藝，其特征在于：所述的步驟(4)中根據細胞密度和營養條件，不定期抽去部分細胞，使罐內細胞長時間保持合適的高密度，然后將結團細胞作為種子，轉種于3～5倍大的反應罐內擴大生產。