[發(fā)明專利]一種高山被孢霉及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710025004.5
• 申請(qǐng)日: 2007-07-09
• 公開（公告）號(hào): CN101113410A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃和;金明杰;肖愛華;任路靜;劉欣;李霜;胡南
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;C12P7/40
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 徐冬濤;劉成群

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高產(chǎn)花生四烯酸的高山被孢霉及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

花生四烯酸(ArachidonicAcid，簡稱AA，即5，8，11，14-二十碳四烯酸)屬于ω-6系列長鏈多不飽和脂肪酸。AA是一種重要的人體必需脂肪酸，是許多二十碳酸衍生物如前列腺素E₂(PGE₂)、前列環(huán)素(PGI₂)、血栓烷A₂(TXA₂)、白三烯Leukotirene?B₄(LTB₄)和C₄(LT?C₄)的直接前體，這些生物活性物質(zhì)對(duì)脂蛋白的代謝、血液流變學(xué)、血管彈性、白細(xì)胞功能和血小板激活等具有重要的調(diào)節(jié)作用。AA還具有調(diào)節(jié)體內(nèi)多種離子通道作用，維持細(xì)胞膜功能，控制細(xì)胞膜的通透性，維持機(jī)體保水性等許多重要的生理功能。同時(shí)，AA是構(gòu)成神經(jīng)組織的重要結(jié)構(gòu)脂類，它對(duì)嬰幼兒的腦發(fā)育和視力功能至關(guān)重要。它能幫助神經(jīng)系統(tǒng)的信息正常傳遞，增強(qiáng)記憶，對(duì)人體視力、大腦功能和協(xié)調(diào)能力起著極為重要的作用。鑒于AA對(duì)嬰幼兒生長的重要作用，世界衛(wèi)生組織(WHO)及聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)權(quán)威推薦：嬰幼兒每日應(yīng)攝取40毫克AA(以每千克體重計(jì)算)，而歐洲和美國已經(jīng)強(qiáng)制要求只有添加AA的嬰兒奶粉方可進(jìn)入市場進(jìn)行銷售。

AA廣泛存在于動(dòng)物體中，過去商業(yè)AA主要來源于豬肝和魚油，但含量極低且不穩(wěn)定、開發(fā)費(fèi)用昂貴，難以滿足社會(huì)的需求，特別是奶制品和制藥行業(yè)所需的AA量很大。十年代初期，人們相繼發(fā)現(xiàn)某些絲狀真菌及微藻類含有花生四烯酸。由于微生物具有生長速度快、油脂及AA含量高、發(fā)酵制備工藝比較簡單且不受原料限制等優(yōu)點(diǎn)，利用微生物法生產(chǎn)花生四烯酸成為各國研究的熱點(diǎn)。而篩選得到富含AA的微生物資源是關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高產(chǎn)花生四烯酸的高山被孢霉。

本發(fā)明另一個(gè)目的是提供該菌在生產(chǎn)花生四烯酸中的應(yīng)用。

一種高山被孢霉(Mortierella?alpina)，菌株代號(hào)為ME-AA01，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏號(hào)為CCTCC?NO：M?207067。

所述的高山被孢霉，該菌的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)基為能提供碳源、氮源的常規(guī)培養(yǎng)基，生長溫度為25～28℃。所述培養(yǎng)基中碳源為糖類，其中糖類為葡萄糖、蔗糖、木糖、甘露糖、果糖中的一種或多種；氮源為有機(jī)或無機(jī)含氮化合物，其中無機(jī)含氮化合物為乙酸銨、氯化銨中的一種或多種，有機(jī)含氮化合物為蛋白胨、酵母膏、玉米漿、牛肉膏中的一種或多種。

所述的高山被孢霉，其中所述培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基(每L)：土豆200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000ml。

所述的高山被孢霉在生產(chǎn)花生四烯酸中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供的高產(chǎn)花生四烯酸的霉菌，菌株代號(hào)為ME-AA01。其形態(tài)為白色菌絲，直徑2-8μm，不產(chǎn)孢子，在PDA培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)3天，形成的菌落為圓形，直徑為5cm。經(jīng)鑒定為高山被孢霉(Mortierella?alpina)。

該菌株在0～38℃均能生長，25～28℃為最適生長溫度，但產(chǎn)AA的最適溫度為23℃。在23℃下，搖瓶發(fā)酵6～7天菌株產(chǎn)生的AA可達(dá)最大值。

ME-AA01菌株在培養(yǎng)液的pH3～9范圍內(nèi)均可生長，并產(chǎn)生花生四烯酸。適宜生長及生成AA的pH為5～7。

ME-AA01菌株適合液體生長，可以通過發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，具有占用空間小，生產(chǎn)規(guī)模較易控制等特點(diǎn)，有利于大規(guī)模生產(chǎn)。ME-AA01菌株生命力強(qiáng)，對(duì)營養(yǎng)要求簡單，生長范圍寬，生產(chǎn)的菌油AA含量高，且易于提取，具有很好的發(fā)展前景。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明提供了一種高產(chǎn)AA的保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M?207067的高山被孢霉菌株，利用該菌株進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，AA產(chǎn)量最高可達(dá)10g/l，產(chǎn)率高達(dá)1.54g/l/d，比目前世界最高水平的日本Higashiyama?K等人報(bào)道的菌株Mortierella?alpina?1S-4(1.3g?l^-1d^-1)和韓國Hwang?BH等人報(bào)道的Mortierella?alpina?DSA-12(1.5g?l^-1d^-1)都要高。

高山被孢霉ME-AA01菌株的獲得不但為我國AA生產(chǎn)增加一個(gè)新品種，更重要的是該菌種可通過液體發(fā)酵罐工業(yè)化生產(chǎn)，因此，該發(fā)明必將對(duì)我國的AA工業(yè)產(chǎn)生積極的推動(dòng)作用。