[發明專利]半乳糖濃度的測定方法及半乳糖診斷試劑盒

無效

• 申請號: 200710024768.2
• 申請日: 2007-06-28
• 公開（公告）號: CN101082574A
• 公開（公告）日: 2007-12-05
• 發明（設計）人: 王爾中
• 申請（專利權）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N33/66;C12Q1/26;C12Q1/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司
• 代理人: 陳忠輝;姚姣陽

技術領域

本發明涉及醫藥、食品、環境等領域內對半乳糖濃度的檢測，尤其涉及利用酶比色法測定半乳糖濃度的方法，以及由此制得的半乳糖診斷試劑盒，屬于半乳糖濃度分析檢測技術領域。

背景技術

牛奶在營養界素有“液體黃金”的美稱，我國早在1992年由七部委聯合提出：“一杯牛奶強壯一個民族”的口號。奶類除不含纖維素外，幾乎含有人體所需要的各種營養素。牛奶中的乳糖進入人體后，經小腸乳糖酶作用分解成葡萄糖和半乳糖。半乳糖是嬰兒大腦發育的必需物質，與嬰兒大腦的迅速成長有密切關系。

牛奶雖好但并不是所有的人都能享受，有些人由于乳糖酶的缺乏，人體不能很好的消化吸收牛奶中的營養素，還會造成鈣、磷、鉀、鐵等元素的吸收障礙，影響嬰幼兒的體格和智力發育，在老年人中，乳糖酶缺乏是造成骨質疏松的重要原因。中國成年人飲用牛乳后乳糖吸收不良的發病率高達86.7％，不耐受指數為0.9。

為了避免不適當飲奶對健康造成的損害，因此最好在飲奶前檢查自己是否耐受乳糖，在飲用牛奶后，測試尿液中半乳糖的濃度，是最常用的一種方法，更為簡便、經濟、可靠。

發明內容

本發明的目的是：提供一種測定半乳糖濃度的方法，以及應用該方法配制而成的半乳糖診斷試劑盒。

為實現本發明的目的，一種酶比色法測定半乳糖濃度的方法，利用半乳糖脫氫酶為作用酶和顯色酶，對待測樣品中的半乳糖進行檢測，采用以下步驟進行：

首先，將測定的樣品與含有輔酶、半乳糖脫氫酶的試劑混勻，使之發生以下反應，

然后，將最終反應物置于紫外/可見光分析儀或半、全自動生化分析儀下，檢測主波長340nm吸光度上升的程度/速度，測算出半乳糖的濃度大小。

實現本發明半乳糖診斷試劑盒可以是單劑，由以下成分組成：

緩沖液??????????20～500mmol/L，

穩定劑??????????1～4000mmol/L，

輔酶????????????1～6mmol/L，

半乳糖脫氫酶????1000～80000U/L。

試劑盒可以是干粉狀態，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

也可以將以上單劑中的各種成分進行組合配制成雙劑，比如：

雙劑的配方不僅僅限于上述表中所列，其中試劑I的成分：輔酶可以放在試劑II；試劑II中的半乳糖脫氫酶也可以放到試劑I，如此可以形成多種配方，不再一一列舉。試劑盒可以是干粉狀態，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

此外，為減少各試劑成分之間的交叉影響、保持試劑的穩定性，以便長期儲存，以上單劑、雙劑的試劑I/試劑II當中通常加入穩定劑，濃度在1～4000mmol/L或0.1％～100％體積比范圍之內。

無論是單劑還是雙劑，輔酶可以是：NADP⁺、NAD⁺或thio-NAD⁺中的一種

用作穩定劑的物質可以是：硫酸銨(Ammonia?Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene?Glycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)中的至少一種。

研究表明，從測定結果的準確性和配制成本的經濟性兩方面綜合考慮，無論是單劑還是雙劑，如下配方成分關系的診斷/檢測試劑盒較為理想，也是本發明的優選方案：

緩沖液??????????100mmol/L，

穩定劑??????????500mmol/L

輔酶????????????3mmol/L，

半乳糖脫氫酶????12000U/L。