[發明專利]血管生成抑制劑HM-X及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200710023411.2
• 申請日: 2007-06-01
• 公開（公告）號: CN101096671A
• 公開（公告）日: 2008-01-02
• 發明（設計）人: 徐寒梅;陳羅勝;殷潤婷;康志安
• 申請（專利權）人: 徐寒梅
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/435;C07K7/08;A61K38/16;A61K38/10;A61P35/00
• 代理公司: 南京知識律師事務所
• 代理人: 高桂珍

一.技術領域：本發明屬于生物工程制藥技術領域。

二.背景技術

研究表明，實體瘤生長依賴于新生血管生成，新生血管不僅可以提供腫瘤所需要的營養和氧氣，排泄代謝產物，而且是遠處轉移的途徑。因此，阻斷新生血管形成可能成為阻止腫瘤生長和轉移的手段，從而激發了對促血管生成分子和抗血管生成分子的廣泛研究。

根據腫瘤的發展，血管生成分為兩個階段：血管前期和血管期。在血管前期，腫瘤穩步生長，腫瘤細胞增長速度基本與細胞凋亡速度持平；在血管期，腫瘤細胞組織快速增長，組織浸潤，血源性播散腫瘤細胞，腫瘤細胞的增生速度并未改變，而凋亡速度減緩(O’Reilly，et?al.，1996)。因此，根據腫瘤血管生成的不同階段的生理狀態和生化改變為靶點，設計各種血管生成抑制劑，控制腫瘤的生長和轉移，就可以達到治療腫瘤的目的。在阻斷腫瘤血管生成方面，現在已經研究、發現了多種血管生成抑制劑。最近，越來越多的研究顯示，針對腫瘤血管期，即腫瘤已經建立的血管設計藥物，可能有著更廣闊的治療前景。很早，人們就知道腫瘤內皮和周圍的基質與正常組織不同，但直到現在才從分子水平認識到這種差別。與正常組織相比，腫瘤血管是高度無序、扭曲的(Konerding，M.A.，et?al.，2001)，很難區別動脈和靜脈，經常出現分流(血液從動脈直接流入靜脈)。腫瘤毛細血管中的血流緩慢，有時出現靜止甚至倒流(Tozer，G.M.，1990)。血液和血管內皮出現低氧性缺氧、營養缺乏和酸性物質，在此環境下，腫瘤血管內皮細胞受到刺激，與正常組織內皮細胞相比，增殖迅速，同時誘導內皮細胞特異性分子，如成纖細胞生長因子(FGF)、血管內皮生長因子(VEGF)等，并激活血管新生(Toyokuni，S.，et?al，1995)。

內皮抑素是能夠抑制內皮細胞增殖的一類血管生成抑制劑，由O‘Reilly等首次發現。內皮抑素是膠原XVIII的C-端片段，分子量為20kD_a，能夠特異性抑制內皮細胞的增殖和遷移，減少膠質細胞瘤血管和血流，有效抑制小鼠各種原發腫瘤。內皮抑素能夠與整合素α5β1相互作用，預示著α5β1可能是endostatin的功能靶點。Endostatin具有Zn²⁺結合位點，這對其抗血管生成活性和分子的穩定性很重要。

國內外大量研究表明，內皮抑素具有體內抑制腫瘤血管生成以及抗腫瘤作用；同時研究表明，利用內皮抑素的抗血管生成治療方法的最大潛力在于克服了腫瘤治療中最棘手的問題：耐藥性和組織毒性。這是因為：不管來源于任何組織的實體腫瘤，治療是針對血管內皮細胞的，內皮細胞不會發生變異，也很少發生突變，因此不會導致耐藥性；而且內皮細胞是唯一顯露于藥物的細胞，克服了藥物可能到達腫瘤中心的難題。盡管內皮抑素呈現出非常誘人的前景，但其缺陷也非常明顯：在動物體內使用時，用量很高，在小鼠動物模型實驗時，內皮抑素達到數十毫克/公斤體重，當這些血管生成抑制劑在人體內使用時，使用劑量會更高。這樣大的藥物使用劑量勢必增加日后該類藥物毒副作用發生的可能性，造成該類藥物質量控制難度加大、生產規模和生產成本增大、藥物價格居高。因此，一個好的抗血管生成藥物應該有便于生產、成本低、使用很低劑量的藥物，就能達到高效的抑制血管生成的效果。

盡管很早就有人提出腫瘤血管靶向性治療實體瘤的想法(Denekamp，J.，1990)，但是缺乏實驗依據。直到1993年，兩位學者利用內皮細胞表面表達的MHCII抗原，將其抗體與蓖麻蛋白融合，成功地運輸到小鼠腫瘤內皮細胞，此抗體-蓖麻蛋白融合體進入并殺死腫瘤內皮細胞、瓦解血管，使腫瘤消退(Burrows，F.J.&Thorpe，P.E.，1993)。這個實驗說明腫瘤血管可以作為治療的靶點有效地清除腫瘤。要獲得腫瘤血管靶向性治療分子，首先需要篩選腫瘤血管特異性表達的分子標記，才能針對此種分子設計治療方案。

其中對腫瘤血管生成相關的重要腫瘤血管內皮細胞標記之一是整合素家族的部分成員。