[發明專利]檸檬酸測定試劑盒及檸檬酸濃度測定方法

無效

• 申請號: 200710023210.2
• 申請日: 2007-06-13
• 公開（公告）號: CN101324504A
• 公開（公告）日: 2008-12-17
• 發明（設計）人: 王爾中
• 申請（專利權）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;C12Q1/26;C12Q1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用酶比色法及酶聯法技術的檸檬酸濃度測定方法，其方法原理如下：

檸檬酸+輔酶A??檸檬酸合成酶??乙酰輔酶A+草酰乙酸+水

乙酰輔酶A+二氧化碳+還原型輔酶??丙酮酸脫氫酶??丙酮酸

+輔酶A+輔酶

將最終反應物置于紫外/可見光分析儀或半、全自動生化分析儀下，檢測主波長340nm吸光度下降的程度/速度，測算出檸檬酸的濃度大小測定結果。

2.一種檸檬酸測定試劑盒，主要成分包括：

緩沖液??????????20——500mmol/L

穩定劑??????????1——4000mmol/L

還原型輔酶??????0.1——0.35mmol/L

輔酶A???????????1——50mmol/L

二氧化碳????????1——50mmol/L

檸檬酸合成酶????1000——80000U/L

丙酮酸脫氫酶????1000——80000U/L

其特征在于：試劑盒可以是干粉狀態，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。二氧化碳以碳酸氫鹽取代，例如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀。

3.根據權利要求2所述檸檬酸測定試劑盒，其特征在于：

由緩沖液、穩定劑、還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳、檸檬酸合成酶、丙酮酸脫氫酶組成單劑試劑。

4.根據權利要求2所述檸檬酸測定試劑盒，其特征在于：由緩沖液、穩定劑、還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳、檸檬酸合成酶、丙酮酸脫氫酶組成雙劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩定劑、還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳、組成；試劑2，由緩沖液、穩定劑、檸檬酸合成酶、丙酮酸脫氫酶組成。還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳、檸檬酸合成酶、丙酮酸脫氫酶在試劑1或試劑2中的位置可以不限。

5.根據權利要求2所述檸檬酸測定試劑盒，其特征在于：

由緩沖液、穩定劑、還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳、檸檬酸合成酶、丙酮酸脫氫酶組成多劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩定劑、還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳組成；試劑2，由緩沖液、穩定劑、丙酮酸脫氫酶組成；試劑3，由緩沖液、穩定劑、檸檬酸合成酶組成。還原型輔酶、輔酶A、二氧化碳、檸檬酸合成酶、丙酮酸脫氫酶在試劑1、試劑2或試劑3中的位置可以不限。

6.根據權利要求2所述檸檬酸測定試劑盒，其特征在于：還包括穩定劑1——4000mmol/L或0.1％-100％體積比。所述穩定劑為：硫酸銨(Ammonia?Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene?Glycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)及防腐劑中的至少一種。