[發(fā)明專利]糖－氫氧化鐵復(fù)合物分子量及分子量分布測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710022931.1
• 申請(qǐng)日: 2007-05-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101059483A
• 公開(kāi)（公告）日: 2007-10-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田遠(yuǎn)年;方文;熊守軍;花傳政
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京生命能科技開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 徐冬濤;劉成群

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子量測(cè)量領(lǐng)域，涉及糖-氫氧化鐵復(fù)合物分子量及分子量分布測(cè)定方法，具體地說(shuō)是以蔗糖鐵(蔗糖-氫氧化鐵復(fù)合物)為代表的糖-氫氧化鐵復(fù)合物的分子量及其分布的測(cè)定方法。

背景技術(shù)

糖-氫氧化鐵復(fù)合物是目前廣泛應(yīng)用的抗缺鐵性貧血的補(bǔ)鐵劑，特別是應(yīng)用于腎臟疾病血液透析所導(dǎo)致的缺鐵性貧血。該類復(fù)合物的分子量及分子量分布是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，研究發(fā)現(xiàn)糖-氫氧化鐵復(fù)合物分子量及分子量分布與藥物的藥理作用、臨床療效和鐵的生物利用率存在著密切的關(guān)系，因此準(zhǔn)確測(cè)定糖-氫氧化鐵復(fù)合物的分子量和分子量分布對(duì)于控制和提高產(chǎn)品質(zhì)量有著十分重要的意義。

糖-氫氧化鐵復(fù)合物的結(jié)構(gòu)核心是多核氫氧化鐵(III)，核心的表面被大量非共價(jià)結(jié)合的糖分子所占據(jù)，從而形成平均分子量從幾千到幾百萬(wàn)道爾頓(da)的大分子復(fù)合物。如上所述：蔗糖鐵的分子量及分子量分布范圍是評(píng)價(jià)該產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo)，準(zhǔn)確測(cè)定糖-氫氧化鐵復(fù)合物的分子量和分子量分布對(duì)于控制和提高產(chǎn)品質(zhì)量有著十分重要的作用。而傳統(tǒng)的測(cè)定大分子多糖分子量的方法多采用高效凝膠過(guò)濾色譜法，這是一種測(cè)定分子量及分布的相對(duì)方法，測(cè)量的準(zhǔn)確性往往依賴于對(duì)分子量標(biāo)準(zhǔn)品的選取。若所選用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與被測(cè)物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)有較大差異，就會(huì)導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果與被測(cè)物的實(shí)際分子量有較大的差異。

目前，一般采用的多糖分子量標(biāo)準(zhǔn)品多為線性分子結(jié)構(gòu)，如葡聚糖、聚麥芽三糖和右旋糖苷等。而糖-氫氧化鐵復(fù)合物卻有特殊的結(jié)構(gòu)，它是糖通過(guò)其活潑羥基取代多核氫氧化鐵膠體母核表面的水分子與之結(jié)合所形成的同心球結(jié)構(gòu)。由蔗糖鐵原子力顯微鏡圖(見(jiàn)圖1)可見(jiàn)蔗糖鐵分子為球狀分子且表面面不光滑，其表面凸出結(jié)構(gòu)是蔗糖絡(luò)合形成的，據(jù)此推斷蔗糖鐵分子為蔗糖分子通過(guò)絡(luò)合并包被三價(jià)鐵母核形成的同心球狀結(jié)構(gòu)。這與多糖的線性結(jié)構(gòu)有很大的不同，如果直接使用一般的多糖分子量標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定糖-氫氧化鐵復(fù)合物的分子量及分布顯然會(huì)帶來(lái)很大的誤差，不利于該類產(chǎn)品的質(zhì)量控制。鑒于此，為了更準(zhǔn)確、更方便的測(cè)定這類復(fù)合物的分子量，在使用一般多糖分子量標(biāo)準(zhǔn)品繪制分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，須采用適當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校正。而另一個(gè)方面，選取合適的糖．氫氧化鐵復(fù)合物標(biāo)準(zhǔn)品繪制分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線，也同樣可以達(dá)到準(zhǔn)確測(cè)定的目的，還可以避免繁瑣的普適校正工作。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是建立一種普適校正法測(cè)定糖-氫氧化鐵復(fù)合物分子量及其分布的高效凝膠過(guò)濾色譜法方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是建立一種無(wú)需校正的測(cè)定糖-氫氧化鐵復(fù)合物分子量及其分布的高效凝膠過(guò)濾色譜法方法。

本發(fā)明的普適校正法的原理為Mark-Houwink經(jīng)驗(yàn)公式【η＝KM^α]。公式中η為特性粘數(shù)，M為分子量，K、α為系數(shù)，普適校正法標(biāo)準(zhǔn)曲線的方程式推導(dǎo)如下：

標(biāo)準(zhǔn)物1：

以lg[η]M-V₀訂定相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，得一次方程為：V₀=a-blgM₁(式1)

標(biāo)準(zhǔn)物2：

由式K1M11+α1=K2M21+α2]]>得