[發(fā)明專利]一種酶拆分制備(R)－6－羥基－8－氯辛酸乙酯的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710022151.7 | 申請日： | 2007-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN101063156A | 公開（公告）日： | 2007-10-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 孫志浩;鄭璞;倪曄;韓麗;楊倩 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12P7/62 | 分類號： | C12P7/62;C12P41/00 |
| 代理公司： | 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人： | 時(shí)旭丹;劉品超 |
| 地址： | 214122江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 拆分 制備 羥基 辛酸 方法 | ||
1.一種酶拆分制備(R)-6-羥基-8-氯辛酸乙酯的方法，其特征是以具有立體選擇性的脂肪酶為催化劑，在單一水相或水/有機(jī)溶劑兩相體系中，對外消旋6-羥基-8-氯辛酸乙酯進(jìn)行拆分，制備光學(xué)純(R)-6-羥基-8-氯辛酸乙酯，步驟如下：
(1)酶源：選用脂肪酶CRL、脂肪酶L-3124、脂肪酶L-3126、脂肪酶LipaseIM、脂肪酶Lipase?MY、脂肪酶Lipase?PS-D、堿性脂肪酶或青霉脂肪酶；
(2)配制反應(yīng)體系：以外消旋6-羥基-8-氯辛酸乙酯為底物，用pH6.0～7.0的磷酸鹽緩沖液配制成反應(yīng)體系，底物濃度為20～180mmol/L；
(3)轉(zhuǎn)化反應(yīng)：在反應(yīng)體系中加入脂肪酶啟動反應(yīng)，加酶濃度為5～20g/L，酶反應(yīng)溫度為30～60℃，搖床轉(zhuǎn)速為150～210r/min，反應(yīng)時(shí)間為0.5～2h，反應(yīng)結(jié)束，離心去除脂肪酶，得到上清液；
(4)萃取處理：上清液調(diào)pH至9.0～10.0，用乙酸乙酯萃取分離，得到含有(R)-6-羥基-8-氯辛酸乙酯的有機(jī)相，用適量無水MgSO4干燥過夜，過濾后進(jìn)行氣相色譜測定含量和對映體過量值；
(5)回收副產(chǎn)物：將萃取分離有機(jī)相后的剩余水相調(diào)pH至2.0～3.0，用乙酸乙酯萃取，分離有機(jī)相得到(S)-6-羥基-8-氯辛酸；
(6)產(chǎn)物提?。簩⒑?R)-6-羥基-8-氯辛酸乙酯的有機(jī)相進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)品，進(jìn)行氣相色譜分析、稱重、測旋光。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所用脂肪酶為Lipase?PS-D、LipaseMY或CRL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是反應(yīng)體系為單一水相，或水/正辛烷，或水/正己烷兩相體系，兩相體積比1∶1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是轉(zhuǎn)化反應(yīng)條件為：底物濃度為45～90mmol/L，加酶濃度為10～20g/L，酶反應(yīng)溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速為170r/min，反應(yīng)時(shí)間為0.5-1h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是在轉(zhuǎn)化反應(yīng)體系中，再添加表面活性劑OP，添加量為反應(yīng)體系質(zhì)量的0.1％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的脂肪酶是固定化脂肪酶，其特征是固定化脂肪酶使用次數(shù)達(dá)到10次。
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