[發明專利]防治溫室蔬菜疫病的菌株PX35

有效

• 申請號: 200710021284.2
• 申請日: 2007-04-26
• 公開（公告）號: CN101063093A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: 郭堅華;徐劉平
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;C12R1/07
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司
• 代理人: 張素卿

一、技術領域

本發明涉及防治溫室蔬菜疫病的單一菌株，屬于農作物防病治病技術領域，專用于蔬菜疫病的無公害防治。

二、技術背景

目前我國保護地蔬菜的種植面積不斷擴大，由于保護地內溫濕條件適宜疫霉的生長，再加上同一品種的連作，造成疫病逐年加重。目前對蔬菜疫病的藥劑防治主要還是使用化學農藥，如：乙磷鋁、甲霜靈、普力克、阿米西達等。但是，使用化學農藥不僅會產生農藥殘留，而且隨著化學農藥的逐年使用疫霉菌的抗藥性也在逐漸增加，如美國密歇根州已經出現了對Ridmil?gold有抗性的辣椒疫霉菌株，并且研究發現當一個菌株對Ridmil?gold產生抗藥性同時不會喪失原有的其他特性。(M.HausbeckR.Fulbright?and?R.Hammerschmidt.An?integrated?approach?to?manage?phytophthora?blighton?Michigans?vine?crops.)。為此菜農只能加大農藥的使用量，由此，農藥使用和依賴程度呈現出惡性循環狀態。農藥的大量使用，使得蔬菜中農藥殘留量超標問題突出。2000年5月份農業部農藥檢定所組織北京、上海、重慶、山東和浙江等5省市的農藥檢定所，對50個蔬菜品種，1293個樣品的農藥殘留進行抽樣檢測，農藥殘留量超標率達30％，殘留濃度高者為允許殘留量的幾倍甚至幾十倍。蔬菜中農藥殘留量的嚴重超標，導致中毒事故時有發生。據衛生部統計數字，1999年我國由于農藥殘留引起的食品店菜性食物中毒菜有37起，急性中毒的例子，還能引起我們的重視，而慢性中毒和蓄積性中毒的情況我們就不得而知，其實其結果會更加可怕。我國出口到日本、韓國等發達國家的蔬菜經常因為農藥殘留達不到他們的標準而被退回，這給許多菜農造成很大損失。為此應該大力推廣種植無公害蔬菜，規范生產標準，盡量減少化學農藥的用量。

無公害蔬菜早已成為世界蔬菜生產的主流。早在20世紀20年代，國外就開始發展無公害蔬菜，其主要生產方式是無土栽培。據不完全統計，世界上單用營養液膜法(NFT)栽培無公害蔬菜的國家就達76個。在新西蘭，半數以上的番茄、黃瓜等果菜類蔬菜是無土栽培的。日本、荷蘭、美國等發達國家，采用現代化的水培溫室，常年生產無公害蔬菜。我國無公害蔬菜的研究和生產始于1982年，該年召開全國生物防治會議，江蘇省率先提出用生物防治代替化學農藥防治。1983年，在全國植?？傉镜拇罅χС窒?，全國23個省、市開展了無公害蔬菜的研究、示范與推廣工作。通過幾年的研究實踐，探索出一套綜合防治病蟲害、減少農藥污染的無公害蔬菜生產術。1985年全國推廣無公害蔬菜生產面積4萬hm2(60萬畝)，至今全國各地幾乎每個市都有無公害蔬菜生產基地。期間，開發了一些成功的生物殺菌劑，如農用鏈霉素、井崗霉素，前者可以配成200mg/L液灌根防治蔬菜軟腐病、青枯病，后者配成1000-1500倍液防治蔬菜炭疽病、霜霉病。但尚未出現對疫病有較高防效的生防菌株。現有技術中按照本實驗室的菌體保藏液專利(公開專利號CN1358838，公開日：2002年7月17日)方法，菌體可室溫保存2～3年。

三、發明內容

技術問題?針對溫室疫病沒有有較高防效的生防菌株制劑現狀，提供開發一種防治蔬菜疫病的單一菌株，專用于防治辣椒、番茄、黃瓜等溫室蔬菜疫病，菌株的防效高，并且有增產功能。

技術方案

防治溫室蔬菜疫病的菌株PX35，為芽孢桿菌屬(Bacillus?sp.)，于2007年01月26日寄存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCCNO.1930。PX35在LB培養基上10h產生單菌落，培養24h菌落乳白色，質地均一，圓形，邊緣有細齒，中間隆起，表面光滑，菌體為短直桿狀，G⁺，產生芽孢。菌株PX35可分泌產纖維素酶、蛋白酶酶活性和產嗜鐵素，對疫病生防有重要意義。

將上述防治溫室蔬菜疫病的菌株PX35在PDA培養液37℃?180rpm振蕩培養20～24h，然后6000rpm離心10min，取PX35濕菌與菌體保藏液(本實驗室的菌體保藏液專利，公開專利號CN1358838，公開日：2002年7月17日)按質量體積比為1∶40配成菌劑，菌劑成品中活菌總濃度為1×10⁹～1×10¹²cfu/ml。所用PDA培養液配制方法為：用200g土豆削皮后切成小塊放到水里煮，沸騰后煮30min，接著用四層醫用紗布過濾，濾液加20g普通蔗糖，定容至1000ml，pH值調至7.2-7.4，121℃滅菌20min。

有益效果