[發明專利]一種分析糖蛋白的方法

有效

• 申請號: 200710017872.9
• 申請日: 2007-05-16
• 公開（公告）號: CN101308141A
• 公開（公告）日: 2008-11-19
• 發明（設計）人: 李錚;陳超;簡強;王婷;孫士生;王芬
• 申請（專利權）人: 陜西北美基因股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N27/64
• 代理公司: 西安智邦專利商標代理有限公司
• 代理人: 徐平

技術領域

本發明涉及一種分析糖蛋白的方法，具體是一種采用凝集素芯片，結合表面增強激 光解析離子化飛行時間質譜技術對糖蛋白進行檢測和鑒定的方法。

背景技術

糖類化合物是生物體維持生命活動所需能量的主要來源，是生物體合成其它化合物 的基本原料，是充當生物體的結構原料，是涉及生命活動本質的生物大分子之一。糖類 具有多個羥基，糖苷鍵又有α、β構型之分，單糖的連接可能產生數目很大的異構體， 因此，糖鏈結構蘊含十分豐富的生物語言信息，是高密度的信息載體。細胞是生物體的 基本單位，種類繁多的細胞形成各種組織，所有細胞表面均覆蓋著一層糖鏈。糖鏈和蛋 白質構成的共價復合物，即糖基化蛋白，簡稱糖蛋白。蛋白質糖基化是一種重要的翻譯 后修飾，約有一半以上的蛋白質是發生糖基化的。糖基化作為一種主要的翻譯后修飾對 蛋白質的結構和功能有著重要影響，如：對蛋白質的折疊、運輸、定位等。在許多生物 過程中蛋白質糖基化起著重要的作用，如免疫保護、病毒的復制、細胞生長、細胞與細 胞之間的黏附、炎癥的產生等。

許多蛋白都發現有糖基化這種翻譯后修飾方式。如轉錄因子、核小孔蛋白、熱休克 蛋白、RNA聚合酶II、致癌基因翻譯產物、酶等。許多疾病的發生、發展過程中糖基化 蛋白的糖基化程度都發生了改變，糖基化異常經常導致疾病的發生，如在帕金森病、風 濕性關節炎和其他與自由基相關的疾病患者體內，檢測到鐵轉移蛋白糖基化水平過高。 鐵轉移蛋白是一種糖基化的金屬轉運血清蛋白，糖基化穩定了鐵轉移蛋白，間接地調節 了鐵離子的平衡。另有大量文獻報道糖基化的紊亂與迅速發展的肌營養不良相關。在目 前臨床應用的腫瘤篩查標志物中絕大部分是糖基化蛋白，特別是有些糖基化發生改變的 糖基化蛋白已應用于人類疾病的診斷、分期和預后評估，例如，診斷原發性肝癌涉及到 甲胎蛋白(AFP)是胎兒發育過程中由胎肝合成的一種含糖量為4％的糖蛋白，由590個 氨基酸殘基組成。每分子AFP含一條糖鏈，胎兒出生時，臍帶血中含AFP為10-100mg/L， 出生1年后，降至與正常人水平，含量極低，難以檢測。原發性肝癌病人血清AFP明顯 上升，因此臨床上用免疫生化技術測定AEP做為診斷肝癌的依據。在后的研究表明：胃 癌、腸癌、胰腺癌等消化系統腫瘤血清AFP含量也升高，而肝炎、肝硬化病人血清也可 伴有暫時性的AFP上升。