[發(fā)明專利]一種從瘋草中提取苦馬豆素的新方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710017844.7
• 申請(qǐng)日: 2007-05-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101050214A
• 公開(kāi)（公告）日: 2007-10-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李勤凡;蒿彩菊;王建華;劉志濱
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07D471/04
• 分類(lèi)號(hào): C07D471/04;A61K36/185
• 代理公司: 西安西達(dá)專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 李文義

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于物質(zhì)成份技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從瘋草中提取苦馬豆素的新方法。

背景技術(shù)

苦馬豆素是瘋草中的主要有毒成分，動(dòng)物長(zhǎng)期采食瘋草能夠引起以中樞神經(jīng)機(jī)能紊亂為特征的中毒性疾病，由于瘋草在世界范圍內(nèi)廣泛分布，是危害草原畜牧業(yè)最嚴(yán)重的毒草，備受關(guān)注。同時(shí)，苦馬豆素是溶酶體內(nèi)α-甘露糖甙酶的抑制劑，近年來(lái)作為一種嶄新的抗癌藥物得到極大的關(guān)注，其特點(diǎn)在于既具有殺傷癌細(xì)胞的作用又具有免疫調(diào)節(jié)作用，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移^[1]。目前，瘋草中毒機(jī)理的研究需要大量的苦馬豆素，同時(shí)，苦馬豆素做為抗癌藥物廣闊的應(yīng)用前景，而苦馬豆素在瘋草中含量低，極性大，不易分離、純化，國(guó)內(nèi)外學(xué)者一直致力于苦馬豆素的提取和純化技術(shù)的研究，并取得了一些突破性的進(jìn)展。Colegate^[2]等首次報(bào)道分離苦馬豆素的方法是，用熱乙酸乙脂索氏提取24h，水溶部分上強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換柱，收集稀氨水洗脫部分，濃縮后的殘留物上藥用瓊脂糖凝膠CL-6B，用氯化鈉梯度洗脫，產(chǎn)物用氨性氯仿提取，回收溶劑后用氯仿/乙醚結(jié)晶和重結(jié)晶，得到白色針狀結(jié)晶。在國(guó)內(nèi)，曹光榮^[3]等報(bào)道的方法是，將植物樣品用酸水浸泡2次，每次12h，酸濾液過(guò)陽(yáng)離子交換柱，濃縮洗脫液中的總生物堿。總生物堿經(jīng)硅膠柱層析，TLC結(jié)合α-甘露糖甙酶活性抑制試驗(yàn)結(jié)果監(jiān)測(cè)，合并同類(lèi)并濃縮，分離出苦馬豆素單體。此外黃有德等(1992)^[4]從變異黃芪中分離出苦馬豆素，趙寶玉等(1993)^[5]從莖直黃芪中分離出苦馬豆素。并且童德文等(2001)^[6]從甘肅棘豆中提取苦馬豆素。以上報(bào)道的苦馬豆素提取方法都采用柱層析法，步驟煩瑣，使用試劑多，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不適合大批量生產(chǎn)。李勤凡等(2005)^[7]，劉志濱等(2006)^[8]用萃取的方法提取甘肅棘豆中的苦馬豆素，步驟比傳統(tǒng)的方法簡(jiǎn)便，但用水從植物中提取，提取液體積大，不宜蒸干水分。在化學(xué)合成苦馬豆素方面國(guó)外已有許多報(bào)道，美國(guó)化學(xué)家Yasuda和Bennet化學(xué)合成苦馬豆素共用21步^[9]，迄今，最簡(jiǎn)單的合成方法也需用9步才完成，并且合成過(guò)程中使用到一些價(jià)格昂貴或毒性強(qiáng)的試劑，使大量生產(chǎn)受限^[10]。因此，目前市場(chǎng)上雖可以購(gòu)買(mǎi)到毫克級(jí)的苦馬豆素，但價(jià)格十分昂貴，該項(xiàng)試驗(yàn)通過(guò)改進(jìn)現(xiàn)有提取工藝流程，用萃取法代替柱層析法，探索一種簡(jiǎn)便易行的提取方法。

發(fā)明人在研究過(guò)程中檢索到的主要參考文獻(xiàn)

1.Colegate?SM，Dorling?PR，Huxtable?CR.A?spectroscopic?investiga-tion?of?swainsonine：anα-mannosidase?inhibitor?isolated?from?swainsinecanecens[J].Aust?J?Chem，1979，(32)：2257～2264

2.曹光榮，李紹君，段得賢，等.黃花棘豆有毒成分的分離與鑒定[J].西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1989，17(3)：1～6

3.黃有德，肖志國(guó)，孟聚誠(chéng)，等.變異黃芪有毒成分的分離與分析[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，1992，6(4)：3～6

4.趙寶玉.瘋草(甘肅棘豆)生物堿系統(tǒng)分析及其毒性的比較病理研究[D]：[博士學(xué)位論文].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2001.12

5.鄒恒琴，徐峰，張忠義，等.一種具有前景的抗癌藥苦馬豆素的研究進(jìn)展[J].中草藥，1997，28(7)：437~439

6.童德文，曹光榮.甘肅棘豆中苦馬豆素的分離與鑒定[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2001，29(3)：5～8

8.李勤凡，王建華，劉志斌等.萃取法提取甘肅棘豆中的苦馬豆素研究初報(bào)[J]，中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21(5)：143～145

9.劉志濱，趙興華，余永濤等.甘肅棘豆中苦馬豆素提取工藝改進(jìn)初報(bào)，西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2006，34(1)：97～104

7.Dale?R.Gardner，Russell?J，et?al.Analysis?of?ocoweeds(Oxytropisspp.)[J].Agric.Food?Chem.2001，49，4573～4580