[發明專利]一種高色價紅曲米制作方法無效
| 申請號: | 200710016078.2 | 申請日: | 2007-06-19 |
| 公開(公告)號: | CN101073394A | 公開(公告)日: | 2007-11-21 |
| 發明(設計)人: | 趙吉興 | 申請(專利權)人: | 山東中惠食品有限公司 |
| 主分類號: | A23L1/182 | 分類號: | A23L1/182;A23L1/29;C12N1/14 |
| 代理公司: | 山東濟南齊魯科技專利事務所有限公司 | 代理人: | 宋永麗 |
| 地址: | 250014山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高色價 紅曲 米制 方法 | ||
1、一種高色價紅曲米制作方法,其特征在于:采用9903A菌種通過誘變分離得到兩株菌株,兩株菌株混合發酵,接種比例為1∶0.8-1∶1.2,通過液體種子發酵的,再通過固體發酵獲得紅曲米產品。
2、根據權利要求1所述的一種高色價紅曲米制作方法,其特征在于:用9903A菌種誘變分離得到兩株菌株的方法是:
(1)基礎培養基:酵母膏2g,蔗糖2g,麥芽膏10g,KH2PO40.5g,MgSO4·7H2O?0.5g,瓊脂20g,水1000ml,PH自然,用做斜面和平板培養;
(2)種子培養基:酵母膏4g,葡萄糖20g,麥芽浸膏10g,蛋白胨5g,KH2PO4?0.5g,MgSO4·7H2O?0.5g,水1000ml,PH5.4,用于大瓶復發酵時培養種子液;
(3)發酵培養基:蔗糖20g,大米粉20g,玉米粉8g,高粱粉8g,大豆粉5g,蛋白胨5g,CaCO3?6g,(NH4)2SO4?5g,KH2PO4?0.2g,水1000ml,PH5.4;
孢子懸液制備:用10ml無菌水洗下培養成熟的斜面孢子,置于預先滅菌的具玻璃球株和20ml無菌水的250ml三角瓶中,于播床上振蕩30-40分鐘,至鏡檢為單孢子;用血球計數計數并用無菌水調節孢子濃度為1×106-107/ml,即成單孢子懸浮液;
誘變路線:
熱水處理→紫外誘變→亞硝基胍誘變→熱水處理→紫外誘變,誘變后得到誘變菌株1-18:102.12紅色價/U·ml-1,1-21:158.7紅色價/U·ml-1,1-22:109.99紅色價/U·ml-1,1-25:132.65紅色價/U·ml-1,1-33:112.2紅色價/U·ml-1,1-60:122.85紅色價/U·ml-1,1-61:140.36紅色價/U·ml-1,再將誘變菌株進行傳代實驗,得到1-21和1-61兩只菌株。
3、根據權利要求2所述的一種高色價紅曲米制作方法,其特征在于:誘變路線中的熱水處理是:取單孢子懸液1ml加入裝有9ml,PH2.0無菌水的試管中,搖勻,于70℃水浴中處理25分鐘,做為紫外誘變的孢子懸液;
紫外誘變:一切操作在避光環境下進行,取上述處理的孢子懸液8ml于直徑9cm的帶攪拌子平皿中,在誘變箱中提前0.5h開紫外燈磁力攪拌,15W30cm照射一定時間,處理液收集于試管中,冰水浴2h,取誘變處理過的孢子懸液按0.2-0.5ml/皿涂布于加有25-30ml基礎培養基瓊脂平板上,28℃避光培養2-3d;
亞硝基胍誘變:于通風櫥中用稱量瓶準確稱量NTG,加助溶劑甲酰胺或丙酮少許1-2ml,以1∶9W/V用PH6.0磷酸緩沖液溶解,保存于棕色瓶中,采用混合平板涂菌法,再將稀釋好的孢子懸液按0.2ml/皿涂布平板,28℃避光培養3-4d。
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