[發(fā)明專(zhuān)利]陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物及其作為雙光子核酸熒光探針的應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710016055.1
• 申請(qǐng)日: 2007-06-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101100465A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于曉強(qiáng);蔣民華;張獻(xiàn);張玉生
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07D401/06
• 分類(lèi)號(hào): C07D401/06;C07D401/14;G01N33/52;G01N21/64
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 李健康

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及咔唑類(lèi)化合物及其應(yīng)用，尤其涉及陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物及其作為雙光子核酸熒光探針的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著熒光顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡和熒光檢測(cè)設(shè)備的不斷升級(jí)和提高，熒光探針的研究與開(kāi)發(fā)也在不斷創(chuàng)新，并且，從分子水平上設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)對(duì)生物體系中的生理病理學(xué)標(biāo)記物具有特異性結(jié)構(gòu)和位點(diǎn)識(shí)別能力的熒光探針?lè)肿樱冀K是生命科學(xué)研究中的重要課題。近幾年來(lái)，雙光子熒光三維成像技術(shù)發(fā)展迅速，而專(zhuān)用的雙光子熒光探針的開(kāi)發(fā)卻未及時(shí)跟上，目前人們利用的仍然是已有的單光子熒光探針?lè)肿樱邕灌ぁ⒎凄ゎ?lèi)染料等DNA及RNA探針，這在很大程度上制約了雙光子三維成像技術(shù)的廣泛應(yīng)用。因而開(kāi)發(fā)、研制具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的雙光子核酸熒光探針是當(dāng)務(wù)之急。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明要解決的問(wèn)題是提供一類(lèi)新型的DNA選擇性識(shí)別熒光探針?lè)肿樱搓?yáng)離子咔唑類(lèi)化合物及其作為雙光子核酸熒光探針的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物，其通式如(I)或(II)所示：

其中：上述R表示C_1-4的烷基或羥烷基。

上述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物，其通式優(yōu)選(II)所示，其中所述R表示C_1-4的烷基或羥烷基。

上述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物，其通式優(yōu)選(II)所示，其中所述R優(yōu)選表示C_1-4的烷基。

上述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物，其通式優(yōu)選(II)所示，其中所述R最優(yōu)選表示C_2-3的烷基。

本發(fā)明所述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物制備方法概述如下：

為了增加分子在生理環(huán)境下的適應(yīng)性，我們首先在氮上引入乙基，然后利用Vilsmeier反應(yīng)合成了9-乙基咔唑的單、雙醛，然后將醛和對(duì)烷基(或羥烷基)-N-甲基碘鹽縮合得到最終產(chǎn)物陽(yáng)離子咔唑化合物。

上述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物的制備反應(yīng)式如下：

本發(fā)明所述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物作為雙光子核酸熒光探針的應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)證明：本發(fā)明的陽(yáng)離子咔唑化合物是一類(lèi)新型的DNA選擇性識(shí)別熒光探針?lè)肿樱c其功能相近的雙光子核酸熒光探針比，本發(fā)明所述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物具有價(jià)格低、激發(fā)能量低、顯色強(qiáng)、生物相溶性較好的特點(diǎn)，咔唑衍生物在雙光子甚至多光子激發(fā)熒光生物標(biāo)記和無(wú)損光動(dòng)力學(xué)治療領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

其中：上述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物優(yōu)選3-(1-甲基-4-乙烯基吡啶)-9-乙基咔唑碘鹽或3，6-雙(1-甲基-4-乙烯基吡啶)-9-乙基咔唑碘鹽。

上述陽(yáng)離子咔唑類(lèi)化合物最優(yōu)選3，6-雙(1-甲基-4-乙烯基吡啶)-9-乙基咔唑碘鹽。

附圖說(shuō)明

圖1MVEC對(duì)煙草野生型植物進(jìn)行染色得到的雙光子熒光顯微照片。

圖2BMVEC對(duì)煙草野生型植物進(jìn)行染色得到的雙光子熒光顯微照片。

圖3BMVEC與傳統(tǒng)核酸染料DAPI對(duì)比實(shí)驗(yàn)得到的雙光子熒光顯微照片。

其中：1為用BMVEC染色得到的雙光子熒光顯微照片；2為用DAPI染色得到的雙光子熒光顯微照片；3為用兩種染料同時(shí)染色得到的雙光子熒光顯微照片。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

4-甲基-N-甲基碘鹽的合成：稱(chēng)取11.16g(0.12mol)的4-甲基吡啶放入100mL的圓底燒瓶，逐滴滴下25.00g(0.18mol)的碘甲烷，半小時(shí)內(nèi)滴完。然后升溫至45℃反應(yīng)2h，冷卻到室溫過(guò)濾，得到白色晶體，產(chǎn)率99.5％。¹H?NMR(90MHz，DMSO，TMS)δ(ppm)：2.60(s，3H)，4.38(s，3H)，7.90(d，J＝8.67Hz，2H)，8.88(d，J＝7.20Hz，2H)。