[發明專利]一種利用海洋酵母菌生產單細胞蛋白的工藝

無效

• 申請號: 200710015661.1
• 申請日: 2007-05-30
• 公開（公告）號: CN101134942A
• 公開（公告）日: 2008-03-05
• 發明（設計）人: 李靜;池振明;王祥紅;高玲美
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P21/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種利用酵母菌生產單細胞蛋白的工藝，特別是涉及一種利用海洋酵母菌由菊芋提取液生產單細胞蛋白的工藝。

背景技術

在過去的20年間，中國的海水養殖業迅速發展，因此海水養殖動物對餌料的需求也穩步增長。我國目前的海水養殖業廣泛使用一些魚肉和微藻如螺旋藻、Chlorella及褐藻作為餌料，此類天然水域繁殖的微型藻類是水產動物的天然餌料，其蛋白質含量較高，氨基酸組成良好，并含有葉綠素及類胡蘿卜素等色素，但由于環境污染和生物資源的匱乏，近年來這類餌料收獲出現一定困難，生產成本增高，加之消化率偏低和適口性較差；故使用上趨于減少。目前已有些酵母菌如Saccharomyces?cerevisiae、Candida?utilis、Candidatropicalis、Hansenula、Pichia和Torulopsis屬的一些種可用于生產單細胞蛋白餌料，與微藻單細胞蛋白餌料相比它們有許多優勢，例如細胞的蛋白含量較高，此外還可以提供B族維生素、礦物質和其他有益成分，這些都有助于海洋動物提高抗病能力；上述酵母菌還有較低的核酸含量(9.7％)，特別是含有較高濃度的必需氨基酸如賴氨酸、蛋氨酸和亮氨酸，并且由酵母菌生產的單細胞蛋白的消化率較高，一般在80％以上。與藻類的培養相比，酵母菌細胞生長非常迅速，細胞密度可達10⁸?cells?ml^-1，并且發酵周期很短，可以在發酵罐中進行酵母菌的大規模培養，而且由于酵母菌培養液的流變特性較好，細胞較大，也很容易從培養液中收集和濃縮細胞。

國外的相關研究表明，海洋酵母菌都有較高的蛋白成分、碳水化合物及很好的氨基酸組成，有的海洋酵母菌還富含飽和脂肪酸。但是目前尚未見利用海洋酵母菌生產富含蛋白及其他營養成分的單細胞蛋白的工藝。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用海洋酵母菌生產單細胞蛋白的工藝，它能滿足現有技術上的上述需求。

一種利用海洋酵母菌生產單細胞蛋白的工藝，其特征在于用菊芋提取液和豆餅水解液制備生產培養基，然后將海洋酵母菌G7a接種到該生產培養基，進行培養；所述的生產培養基中菊芋提取液和豆餅水解液的重量比為1∶1～2。

上述利用海洋酵母菌生產單細胞蛋白的工藝所用的海洋酵母菌G7a的菌種保藏號為CGMCCNo.2006；保藏日期為2007年4月16日，保藏機構為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：中國科學院微生物研究所。

本發明的優點在于：所用的海洋酵母菌G7a經鑒定為Cryptococcus?aureus，有非常高的蛋白含量，廣泛的碳源生長范圍，特別是能分泌大量的胞外菊糖酶，可以利用菊芋提取液生長，因此可以用廉價的菊芋提取液取代葡萄糖作為主要碳源進行酵母菌G7a的大規模培養，以制備單細胞蛋白，可以解決因生物資源匱乏而出現的微藻類餌料的生產問題，又可用價格便宜的豆餅粉水解液代替蛋白胨和酵母粉作為氮源，能使單細胞蛋白的生產成本更低，生物量高達5.3gl^-1，蛋白含量占細胞干重的53％，遠高于已有的單細胞蛋白餌料的蛋白含量；核酸含量很低為2.1％，必需氨基酸含量非常高，特別是能夠促進海洋魚類生長的賴氨酸和亮氨酸分別為12.6％和9.1％。因此所用的G7a作為一種高產單細胞蛋白的新型海洋酵母菌，具有很高的技術優勢和廣泛的應用前景。

具體實施方式

1.生產培養基的制備

①菊芋提取液的制備：稱取新鮮菊芋洗凈后切片，加入冷陳海水，于80℃水浴15min，然后冷卻，所得漿液用4層紗布過濾，將濾液用陳海水稀釋至菊芋的重量百分含量為2-8％。

②豆餅水解液的制備：稱取32g豆餅粉與250ml?0.25N鹽酸(自來水配置)混合后，于14磅壓力下滅菌25min，冷卻后，用1N的NaOH水溶液將所得混合液pH調至5.5-7.0，過濾取上清液，用自來水稀釋至豆餅粉的重量百分濃度為1.0％-5.0％。

③生產培養基的制備：生產培養基由上述菊芋提取液和豆餅水解液按2∶3的重量比例配制而成。所述的菊.芋提取液與豆餅水解液的重量比例可為1∶1-2。

2.海洋酵母菌G7a的保存和培養

本發明的海洋酵母菌Cryptococcus?aureus?G7a，采用由海水配制的YPD培養基培養，該海水YPD培養基含2.0％葡萄糖、1.0％酵母浸出物和2.0％蛋白胨。培養好的海洋酵母菌G7a于4℃保存。