[發(fā)明專利]淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710014187.0
• 申請(qǐng)日: 2007-04-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101078014A
• 公開(kāi)（公告）日: 2007-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 公茂慶;鄧緒禮;閆歌;劉波;寇景軒;王懷位;程鵬;朱昌亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省寄生蟲(chóng)病防治研究所
• 主分類號(hào): C12N15/12
• 分類號(hào): C12N15/12;C07K19/00;A61K38/17
• 代理公司: 濟(jì)寧宏科利信專利代理事務(wù)所
• 代理人: 樊慶年;張景宏

技術(shù)領(lǐng)域：本發(fā)明屬于基因工程領(lǐng)域，涉及一種來(lái)自于淡色庫(kù)蚊溴氰菊酯抗性的細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因。

背景技術(shù)及發(fā)明內(nèi)容：細(xì)胞色素P450單加氧酶是昆蟲(chóng)體內(nèi)參與各類殺蟲(chóng)劑以及其它外援性和內(nèi)源性化合物化代謝的主要解毒酶系。細(xì)胞色素P450(簡(jiǎn)稱CYP)是細(xì)胞色素P450單加氧酶系的末端氧化酶，起著與底物結(jié)合以及從NADPH傳遞電子到NADPH細(xì)胞色素P450還原酶的重要作用。細(xì)胞色素P450功能多樣，特別是能夠代謝目前廣泛使用的殺蟲(chóng)劑如擬蟲(chóng)菊酯類、氨基甲酸酯類等，其與昆蟲(chóng)抗藥性形成機(jī)制的研究成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。近些年來(lái)，隨著分子生物學(xué)及其技術(shù)的發(fā)展，克隆昆蟲(chóng)P450基因、研究其系統(tǒng)進(jìn)化以及與抗藥性的關(guān)系越來(lái)越引起重視。昆蟲(chóng)細(xì)胞色素P450與諸多殺蟲(chóng)劑，尤其目前廣泛使用的擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑的抗性密切相關(guān)。目前，在眾多已知的昆蟲(chóng)細(xì)胞色素P450家族中，被認(rèn)為與菊酯類殺蟲(chóng)劑抗性關(guān)系最為密切的主要為CYP6家族基因。

本發(fā)明所述的淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因是發(fā)明人在山東省寄生蟲(chóng)病防治研究所醫(yī)學(xué)昆蟲(chóng)學(xué)研究室應(yīng)用兼并引物，以淡色庫(kù)蚊溴氰聚酯抗性品系提取的RNA為模板，降落RT-PCR技術(shù)克隆擴(kuò)增，并采用快速末端擴(kuò)增法克隆獲得。序列經(jīng)拼接獲得淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因cDNA全長(zhǎng)，為1639bp；其開(kāi)放閱讀框?yàn)?527bp，編碼508個(gè)氨基酸。在NCBI網(wǎng)站上用BLAST完成序列同源性分析，表明其為新基因。經(jīng)半定量RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR證實(shí)，該基因在淡色庫(kù)蚊溴氰聚酯抗性品系中高表達(dá)。因此，推測(cè)淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因可能與淡色庫(kù)紋溴氰聚酯抗性有關(guān)。

由于淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因在GenBank中為新基因，本發(fā)明人對(duì)該基因的結(jié)構(gòu)和功能研究成果均為開(kāi)創(chuàng)性的。美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(National?Center?for?Biotechnology?Information，NCBI)已正式接收該基因?yàn)镚enBank的新成員，接收號(hào)為：AY662654。

淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因序列：1639bp

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