[發(fā)明專利]一種富集光合細(xì)菌的培養(yǎng)基

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710011997.0
• 申請日: 2007-07-06
• 公開（公告）號: CN101113418A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬溪平;潘玲;孫學(xué)凱;付寶榮;徐成斌;李法云;冷陽
• 申請（專利權(quán)）人: 遼寧大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20
• 代理公司: 沈陽杰克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 楊華

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種富集細(xì)菌的培養(yǎng)基，特別涉及一種富集光合細(xì)菌的培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

光合細(xì)菌是一大類能進(jìn)行光合作用的原核生物的總稱。研究應(yīng)用的實(shí)踐表明，光合細(xì)菌能利用多種硫化物和有機(jī)物作為其光合作用的供氫體和有機(jī)碳源，在高濃度的有機(jī)廢水處理與資源化、水產(chǎn)養(yǎng)殖的水質(zhì)調(diào)控與促進(jìn)健康生長、在農(nóng)業(yè)中作為高效活性菌肥等方面，發(fā)揮著十分有益的和令人矚目的作用。

光合細(xì)菌是一類不產(chǎn)氧的特殊生理類群的原核微生物的總稱，是最早出現(xiàn)的具有原始光合成體系的原核微生物，在自然界的碳素、氮素、硫素轉(zhuǎn)化循環(huán)中起重要作用。光合細(xì)菌營養(yǎng)豐富，細(xì)胞干物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量高達(dá)60％以上，光合細(xì)菌還含有多種維生素，尤其是B族維生素極為豐富，VB12、葉酸、泛酸、生物素的含量遠(yuǎn)高于酵母。此外，光合細(xì)菌還含有大量的類胡蘿卜素、輔酶Q等生理活性物質(zhì)。因此，光合細(xì)菌具有很高的營養(yǎng)價(jià)值，在水產(chǎn)和畜禽養(yǎng)殖上有著很高的應(yīng)用價(jià)值。

光合細(xì)菌的推廣和應(yīng)用，關(guān)鍵在于需要合適的培養(yǎng)基質(zhì)，但目前經(jīng)典的用于富集光合細(xì)菌的常規(guī)培養(yǎng)基，主要配方為：氯化銨1g，碳酸氫鈉1g，磷酸氫二鉀0.2g，乙酸鈉1～5g，七水硫酸鎂0.2g，氯化鈉0.5～2g，生長因子10ml，微量元素溶液10ml，蒸餾水980ml，(見《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》)，其平均富集的時(shí)間為2～8周，周期長，且存在培養(yǎng)基成分種類多，成本較高的缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容：

為了解決上述問題，本發(fā)明提供一種富集光合細(xì)菌的培養(yǎng)基，用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)光合細(xì)菌，培養(yǎng)速度快，成本低。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種富集光合細(xì)菌的培養(yǎng)基，其特征在于含有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、酵母膏和羥基丁二酸(蘋果酸)；在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，每1000ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入0.1g～3.0g的酵母膏和0.5g～2.0g的羥基丁二酸。

優(yōu)選的，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，每1000ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入1.0g的酵母膏和1.5g的羥基丁二酸。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基是光合細(xì)菌的常用培養(yǎng)基。也就是現(xiàn)有技術(shù)中經(jīng)常用的，并已公開的光合細(xì)菌培養(yǎng)基。

調(diào)節(jié)本發(fā)明培養(yǎng)基pH為7～9，121℃滅菌30min。將光合細(xì)菌接種于培養(yǎng)基中，振蕩混勻，置于光照培養(yǎng)箱中光照培養(yǎng)，光照條件為1500～2000lux，溫度為30±1℃。

酵母膏對光合細(xì)菌的生長量的影響隨著酵母膏的濃度的增加而增加，經(jīng)過7天的光照培養(yǎng)后，當(dāng)酵母膏的用量小于3g/L時(shí)(每1000ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入3.0g)，其菌體繁殖速度很快，菌液OD₆₆₀達(dá)1.9，當(dāng)酵母膏的用量大于3g/L時(shí)，其OD₆₆₀值無明顯變化，菌液OD₆₆₀為2.0～2.1。因此，酵母膏的用量以0.1g/L～3.0g/L的酵母膏為宜。

羥基丁二酸對光合細(xì)菌的生長量的影響，隨著羥基丁二酸的濃度的增加而增加，經(jīng)過7天的光照培養(yǎng)后，當(dāng)羥基丁二酸的用量小于2.0g/L(每1000ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入2.0g)時(shí)，其菌體繁殖速度很快，菌液OD₆₆₀達(dá)1.7，當(dāng)羥基丁二酸的用量大于2.0g/L時(shí)，其OD₆₆₀值無明顯變化，菌液OD₆₆₀為1.8～1.9。因此，羥基丁二酸的用量以0.5g/L～2.0g/L為宜。

本發(fā)明的有益效果是：

1、富集培養(yǎng)速度快。由于在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入了酵母膏、羥基丁二酸等營養(yǎng)成分，為光合細(xì)菌創(chuàng)造了一個(gè)更好的厭氧環(huán)境，使光合細(xì)菌生長速度快，培養(yǎng)5天后，菌液顏色逐漸變深，由淺紅轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t最后變?yōu)樯罴t，培養(yǎng)其OD₆₆₀為1.7～2.0。

2、光合細(xì)菌生長期延長，最大生長量提高。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，菌液OD₆₆₀逐漸增加，培養(yǎng)4天時(shí)，其OD₆₆₀為1.2～1.5，比使用基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)光合細(xì)菌時(shí)的OD₆₆₀有所提高，培養(yǎng)8～12天時(shí)，菌液生長量達(dá)最高峰，其OD₆₆₀為2.0～3.0。光合細(xì)菌的生長期延長了3～7天，對其繁殖更有促進(jìn)作用。