[發明專利]白眉蝮蛇去整合素定點突變體cDNA的克隆、表達及其蛋白質制法與應用

有效

• 申請號: 200710011961.2
• 申請日: 2007-07-03
• 公開（公告）號: CN101113448A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發明（設計）人: 趙寶昌
• 申請（專利權）人: 趙寶昌
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/435;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 大連科技專利代理有限責任公司
• 代理人: 于忠晶

1.白眉蝮蛇去整合素的定點突變體cDNA序列，其特征是：將白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突變成C145、C146和A148，得cDNA含219個堿基對，核苷酸序列為：

GAGGCCGGAG??AAGAATGTGA??CTGTGGCTCT??CCTGGAAATC??CGTGCTGTGA??50

TGCTGCAACC??TGTAAACTGA??GACAAGGAGC??ACAGTGTGCA??GAAGGACTGT?100

GTTGTGACCA??GTGCAGATTT??ATGAAAAAAG??GAACAGTATG??CCGGCCAACA?150

AGGGGTGATG??ACATGGATGA??TTACTGCAAT??GGCATATCTG??CTGGCTGTCC?200

CAGAAATCCC??TTCCATGCC??????????????????????????????????????219。

2.根據權利要求1所述的白眉蝮蛇去整合素的定點突變體cDNA的克隆、表達，其特征是：其編碼蛋白質由73個氨基酸組成，其Ile49和Ala50被Pro49和Thr50所取代，氨基酸順序如下：

Glu?Ala?Gly?Glu?Glu?Cys?Asp?Cys?Gly?Ser?Pro?Gl?y?Asn?Pro?Cys?Cys?Asp

?1???????????????5??????????????????10???????????????????15

Ala?Ala?Thr?Cys?Lys?Leu?Arg?Gln?Gly?AlaGln?Cys?Ala?Glu?Gly?Leu?Cys

?????????20?????????????????25?????????????????30

Cys?Asp?Gln?Cys?Arg?Phe?Met?Lys?Lys?Gly?Thr?Val?Cys?Arg?Pro?Thr?Arg

35??????????????????40??????????????????45??????????????????50

Gly?Asp?Asp?Met?Asp?Asp?TyrCys?Asn?Gly?Ile?Ser?Ala?Gly?Cys?Pro?Arg

????????????55?????????????????60??????????????????65

Asn?Pro?Phe?His?Ala

????70??????????????。

3.白眉蝮蛇去整合素的定點突變體cDNA表達的編碼蛋白質的制備，其特征是：將白眉蝮蛇去整合素cDNA的A145、T146、G148突變成C145、C146和A148，將帶有定點突變的cDNA分別構建于質粒pET23b和pPIC9K，將質粒轉化入微生物，得到其編碼的蛋白質。