[發明專利]一種快速測定干血血型的膠體金試紙卡及其制備

無效

• 申請號: 200710011303.3
• 申請日: 2007-05-15
• 公開（公告）號: CN101074961A
• 公開（公告）日: 2007-11-21
• 發明（設計）人: 王瑞恒
• 申請（專利權）人: 遼寧師范大學
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種快速測定干血血型的膠體金試紙卡及其制備方法，屬于法醫物證檢驗領域的發明。

背景技術

ABO血型系統的確立，至今已有百余年的歷史，該系統的確立是人類醫學發展的里程碑，它也是法醫學檢驗上應用的最早血型系統，它的應用給案件的偵破及訴訟帶來極大的方便。

目前ABO血型系統仍然是我國法醫學上的應用最為普遍的系統，只要犯罪現場發現血跡，就必須測定其血型，但現在仍然采用傳統的血清學方法檢驗。該方法檢驗干血跡的血型，具有很大的弊端。第一，靈敏度低。檢驗需要一定的“量”，有時在現場提取的血跡由于量太少，不足以鑒定血型；第二，準確性差。對于現場提取的不潔凈檢材的檢驗，由于特異性差，所以結果不準確；同時由于該方法受血清質量的制約，有時由于血清的質量導致錯誤的結論；第三，檢驗必須在實驗室進行，不能在犯罪現場進行，不能適應快速偵破案件的要求；第四，費時費力，測定干血跡血型時，測定一個樣品需要2-3小時。第五，傳統的血清學方法每次檢驗都必須使用新鮮的A型、B型指示紅細胞，在司法實踐中難以獲得，也很不方便。

膠體金技術是二十世紀八十年代后期發展起來的高科技技術，它的基本原理是：氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，這種球形的粒子對蛋白質等大分子有很強的吸附功能，由于靜電作用這些金顆粒成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金。吸附機理是膠體金顆粒表面帶負電荷，與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。

這項技術的出現使得許多煩瑣的檢驗得以快速準確的進行，而且檢驗的靈敏度也大大提高，目前醫學檢驗上廣泛使用的甲型肝炎、乙型肝炎、艾滋病、梅毒、早孕檢測試紙卡均為金標試紙卡，這種檢驗試紙不需要專門的檢測儀器，肉眼即可觀察，具有快速、準確、靈敏的優點。

發明內容

本發明為一種快速檢驗干血血型的膠體金試紙卡，可快速、準確檢驗干血的ABO血型。干血跡經浸泡溶解后，滴加到試紙卡的加樣孔上，樣品中所含的紅細胞膜上的A型、B型抗原與試紙卡上的膠體金標記的抗血清發生特異性結合，形成攜帶膠體金的抗原抗體復合物，在層析作用下，該復合物沿硝酸纖維素膜向前移動，當移動至固定有底物的區域時，樣品中相應的抗原抗體復合物，被硝酸纖維素膜上預埋的底物特異性捕獲、富積，由于膠體金的特殊作用，在試紙卡直接顯示紅色陽性標記帶，如果是AB型血，除對照帶外，出現A標記帶和B標記帶；A型血則除對照帶外只出現A標記帶；B型血則除對照帶外只出現B標記帶；O型血則除對照帶外不出現標記帶；無效卡沒有任何標記帶顯示。整個過程不超過5分鐘，快速準確，靈敏度高，特異性性強，不需要任何儀器，如圖1。

附圖說明

圖1是試紙卡檢驗示意圖；

圖2是試紙卡組裝示意圖。

具體實施方式

試紙卡縱向分三層，最下層是塑料支撐物，其上吸水濾紙，最上面是硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜從上到下分為加樣區、抗體區、底物區和對照區，抗體區固定膠體金標記的抗A、抗B抗體；底物區固定特異性捕獲抗A、抗B凝集素；對照區固定羊抗人IgG，如圖2。

該試紙卡對抗A、抗B抗體進行了標記，獲得膠體金標記的抗體，制成金標試紙卡，檢材中的抗原與相應抗體結合后，形成抗原抗體復合物，該復合物經特殊底物特異性捕獲后，在試紙卡直接得到陽性標記帶，整個過程不超過5分鐘，不需要專門的檢測儀器，肉眼即可觀察。

需要說明的是，也可以將抗A、抗B抗體分別制作在兩張試紙卡上，亦即在一張試紙卡上或者固定抗A抗體，或者固定抗B抗體，形成A抗原檢測卡和B抗原檢測卡，對A型血、B型血抗原分兩次分別檢驗，這樣一來，如果是A型血，除對照帶外，在A抗原檢測試紙卡出現A標記帶；如果是A型血，除對照帶外，在A抗原檢測試紙卡出現A標記帶；如果是B型血，除對照帶外，在B抗原檢測試紙卡出現B標記帶；如果是AB型血，除對照帶外，在A抗原檢測試紙卡和B抗原檢測試紙卡均出現標記帶；如果是O型血，除對照帶外，在A抗原檢測試紙卡和B抗原檢測試紙卡均不能出現標記帶；無效卡沒有任何標記帶顯示。

本發明可快速、準確獲得法醫物證的ABO血型，可用于法醫物證檢驗。