[發明專利]富硒聯合固氮菌及其冷凍干粉、液體和固體肥料的制法

無效

• 申請號: 200710010871.1
• 申請日: 2007-04-09
• 公開（公告）號: CN101054564A
• 公開（公告）日: 2007-10-17
• 發明（設計）人: 崔澎
• 申請（專利權）人: 崔澎
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05G1/00;C05F11/08;C05F11/02;C05F3/02;C05B17/00;C05D9/00;C05F17/00;C12R1/065
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1.一種富硒聯合固氮菌的制法，其特征在于：

(一)、其培養基的組分重量比為：

????????????????Na₂SeO₃·5H₂O????????0.8-1.0％

????????????????蛋白胨??????????????????0.9-1.1％

????????????????酵母膏??????????????????0.4-0.6％

????????????????NaCl????????????????????0.4-0.6％

????????????????色氨酸??????????????????50μg/ml

????????????????20％濃度的稀土水溶液????1-2％

????????????????水??????????????????????其余用水

培養基配制好后裝入茄子瓶按50μg/ml加入色氨酸，經滅菌后按5％-10％接種，在30℃-34℃200rmp/分下，搖瓶發酵24-48小時；

(二)、種子罐按其容積的60％注入培養基滅菌后，溫度降入50℃以下時，按35μg/ml注入色氨酸，溫度低于35℃后按5-10％接種；

(三)、011號罐A15單獨發酵，012號罐N13.E26混合發酵，其發酵條件為溫度30-35℃，壓力0.05MPa，空氣流量1∶0.2-0.3，轉速200rmp時間8-10h，其后壓入大罐，兩罐壓出比為2∶1，取樣為OD₀₀₀＞1，PH＞7.5，鏡檢菌體形態；

(四)、大罐滅菌后，溫度低于50℃，注入色氨酸，按25μg/ml，溫度低于35℃時，接種1-3％，在溫度30℃-35℃、壓力0.05Mpa、空氣流量1∶0.2-0.3、轉速200rmp下，發酵6-8h，取樣OD＞0.9、PH＞7，IAA值：0.37，鏡檢活菌數大于10⁸個/ml；

(五)、加防腐劑、保護劑，調整PH至7-7.5，符合相關標準要求，

(六)、封裝產品，得富硒聯合固氮菌劑亦即其液體肥料。

2.根據權利要求1所述的制法，其特征在于：所述接種其菌種為中科院微生物所提供的，固氮巨大芽胞桿菌，固氮糞產堿桿菌和固氮陰溝腸桿菌。

3.根據權利要求1所述的富硒聯合固氮菌的制法，其特征在于：所述的滅菌條件為：溫度120℃-125℃，壓力0.1-0.15MPa，時間20-25min。

4.富硒聯合固氮菌冷凍干粉的制法，其特征在于：在權利要求1所述制法的第(五)步后按技術常規操作制得冷凍干粉。

5.富硒聯合固氮菌固體肥料的制法，其特征在于：培養基組分重量比為：

????????草炭土???????????50-70％

????????雞糞干???????????25-35％

????????石膏?????????????0.8-1.2％

????????稀土?????????????1-2％

????????KH₂PO₄?????????0.4-0.6％

????????Na₂SeO₃·5H₂O?0.8-1％

????????葡萄糖???????????1.8-2.2％

????????NaCl?????????????1.8-2.2％

????????6-Ba?????????????0.08-0.12％

????????????PH值????6-7

????????????水含量??60-65％

制法：將草炭、雞糞，干燥、粉碎、過篩與各組分混合均勻，加入10％的EM菌劑，含水量在60-65％、PH值6-7，配制好培養基，培養基建堆發酵滅菌。溫度降到30℃以下后按上述制法第(四)步發酵后的菌種，再經30-35℃，24-36小時的堆料發酵，測試各種指標符合相關標準要求即得固體富硒固氮菌肥。