[發明專利]高唾液酸含量的免疫球蛋白抗體的制備方法與應用

無效

• 申請號: 200710009304.4
• 申請日: 2007-07-30
• 公開（公告）號: CN101358225A
• 公開（公告）日: 2009-02-04
• 發明（設計）人: 韓守法;韓家淮
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;A61K39/395;A61P37/02;A61P29/00;A61P19/02
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及一種免疫球蛋白抗體，尤其是涉及一種采用糖基轉移酶催化增加免疫球蛋白 抗體上的唾液酸含量的方法及其應用。

背景技術

免疫球蛋白抗體，如靜脈注射免疫球蛋白G，被廣泛用于治療慢性自我免疫疾病等 (1.Imbach，P.，Barandun，S.，d′Apuzzo，V.，et?al，High-dose?intravenous?gammaglobulin?for idiopathic?thrombocytopenic?purpura?in?childhood，Lancet?i，1228(1981)；2.Blanchette，V，Imbach， P.，Andrew，M.，et.al.Randomised?trial?of?intravenous?immunoglobulin?G，intravenous?anti-D，and oral?prednisone?in?childhood?acute?immune?thrombocytopenic?purpura，Lancet?344，703(1994)； 3.Y.Sultan，M.D.Kazatchkine，P.Maisonneuve，U.E.Nydegger，Anti-idiotypic?suppression?of autoantibodies?to?factor?VIII(antihaemophilic?factor)by?high-dose?intravenous?gammaglobulin Lancet?ii，765(1984)；4.D.R.Jayne，M.J.Davies，C.J.Fox，C.M.Black，C.M.Lockwood， Treatment?of?systemic?vasculitis?with?pooled?intravenous?immunoglobulin?Lancet?337，1137 (1991)；5.P.LeHoang，N.Cassoux，F.George，N.et.al.D.Kazatchkine，Intravenous immunoglobulin(IVIg)for?the?treatment?of?birdshot?retinochoroidopathy，Ocul.Immunol.Inβamm. 8，49(2000))。免疫球蛋白抗體上的糖基的結構是非均一的，含有不同結構的糖基的免疫球 蛋白抗體有不同的生理活性。比如，靜脈注射免疫球蛋白G含有兩個N-連接糖基，其N-連接糖 基有不同的末端結構，末端結構為唾液酸的靜脈注射免疫球蛋白G在總的靜脈注射免疫球蛋白 G中的比例低于5％(Routier，F.H.，Hounsell，E.F.，Rudd，P.M.，et.al.Quantitation?of?the oligosaccharides?of?human?serum?IgG?from?patients?with?rheumatoid?arthritis：a?critical?evaluation of?different?methods?J.Immunol.Methods?213，113(1998))。而恰恰是這含量不足5％、含有 唾液酸的靜脈注射免疫球蛋白G是治療抗炎癥的有效成分(Yoshikatsu?Kaneko，Falk Nimmerjahn，Jeffrey?V.Ravetch，Anti-Inflammatory?Activity?of?Immunoglobulin?G?Resulting?from Fc?Sialylation，Science?313，670(2006))，大劑量的靜脈注射免疫球蛋白G在人體內會誘發嚴 重的副反應。因此提高靜脈注射免疫球蛋白G上N-連接糖基末端唾液酸的含量對提高它的藥 效，降低用藥劑量以減輕副反應有重要醫療價值。

發明內容

本發明的目的在于提供一種高唾液酸含量的免疫球蛋白抗體的制備方法及其應用。

本發明的技術方案是采用糖基轉移酶催化方法將唾液酸連接到免疫球蛋白抗體的N-連接 糖基上，用于有效提高免疫球蛋白的唾液酸含量，通過把不含有唾液酸的成分轉變為含有唾 液酸的有效成分，而提高其活性藥物成分的比例。

本發明所述的一種高唾液酸含量的免疫球蛋白抗體的制備方法的具體步驟為：

1)用胞苷-5’-磷酸-唾液酸合成酶催化唾液酸與胞苷-5’-三磷酸(CTP)反應生成胞苷-5’- 磷酸-唾液酸；