[發(fā)明專利]檢測煙草病毒系列免疫膠體金試劑及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710008891.5
• 申請日: 2007-04-26
• 公開（公告）號: CN101294963A
• 公開（公告）日: 2008-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳祖建;林志鏗;謝聯(lián)輝;謝荔巖
• 申請（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/544;G01N33/532;G01N33/52
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1、檢測TMV病毒的免疫膠體金試紙條的制備方法，包括以下步驟：

(1)多克隆抗體：取純化的煙草花葉病毒注射兔子，采血，取血清，提純抗體IgG，純度＞95％；

(2)膠體金：將100ml0.01％氯化金用2-3ml的1％檸檬酸三鈉還原成15nm-40nm的顆粒溶液；

(3)TMV免疫膠體金溶液：用0.1mol/L?K₂CO₃將膠體金溶液的pH值調(diào)至7-8，將膠體金溶液按100ml膠體金溶液中加入0.5mg-2mg步驟(1)的TMV多克隆抗體，混合均勻，得TMV免疫膠體金溶液；

(4)將上述的TMV免疫膠體金溶液點(diǎn)到玻璃纖維上，形成TMV膠體金；

(5)將TMV多克隆抗體溶液和羊抗兔多克隆抗體，分別點(diǎn)在硝酸纖維膜的不同位置上；

(6)將濾樣紙、膠體金、硝酸纖維素膜和吸水紙依次粘貼到一張不干膠的膠板上，然后切割成試紙條；

(7)真空干燥：真空泵內(nèi)的溫度控制在15-25℃；真空干燥的時(shí)間控制在2-5小時(shí)；真空泵內(nèi)的大氣壓不高于0.1毫巴。

2、根據(jù)權(quán)利要求1的方法制備的檢測TMV病毒的免疫膠體金試紙條。

3、檢測CMV病毒的免疫膠體金試紙條的制備方法，包括以下步驟：

(1)多克隆抗體：取純化的黃瓜花葉病毒注射兔子，采血，取血清，提純抗體IgG，純度＞95％；

(2)膠體金：將100ml?0.01％氯化金用2-3ml的1％檸檬酸三鈉還原成15nm-40nm的顆粒溶液；

(3)CMV免疫膠體金溶液：用0.1mol/L?K₂CO₃將膠體金溶液的pH值調(diào)至7-8，將膠體金溶液按100ml膠體金溶液中加入0.5mg-2mg步驟(1)的CMV多克隆抗體，混合均勻，得CMV免疫膠體金溶液；

(4)將上述的CMV免疫膠體金溶液點(diǎn)到玻璃纖維上，形成CMV膠體金；

(5)將CMV多克隆抗體溶液和羊抗兔多克隆抗體，分別點(diǎn)在硝酸纖維膜的不同位置上；

(6)將濾樣紙、膠體金、硝酸纖維素膜和吸水紙依次粘貼到一張不干膠的膠板上，然后切割成試紙條；

(7)真空干燥：真空泵內(nèi)的溫度控制在15-25℃；真空干燥的時(shí)間控制在2-5小時(shí)；真空泵內(nèi)的大氣壓不高于0.1毫巴。

4、根據(jù)權(quán)利要求3的方法制備的檢測CMV病毒的免疫膠體金試紙條。

5、檢測PVY病毒的免疫膠體金試紙條的制備方法，包括以下步驟：

(1)多克隆抗體：取純化的馬鈴薯Y病毒注射兔子，采血，取血清，提純抗體IgG，純度＞95％；

(2)膠體金：將100ml??0.01％氯化金用2-3ml的1％檸檬酸三鈉還原成15nm-40nm的顆粒溶液；

(3)PVY免疫膠體金溶液：用0.1mol/L?K₂CO₃將膠體金溶液的pH值調(diào)至7-8，將膠體金溶液按100ml膠體金溶液中加入0.5mg-2mg步驟(1)的PVY多克隆抗體，混合均勻，得PVY免疫膠體金溶液；

(4)將上述的PVY免疫膠體金溶液點(diǎn)到玻璃纖維上，形成PVY膠體金；

(5)將PVY多克隆抗體溶液和羊抗兔多克隆抗體，分別點(diǎn)在硝酸纖維膜的不同位置上；

(6)將濾樣紙、膠體金、硝酸纖維素膜和吸水紙依次粘貼到一張不干膠的膠板上，然后切割成試紙條；

(7)真空干燥：真空泵內(nèi)的溫度控制在15-25℃；真空干燥的時(shí)間控制在2-5小時(shí)；真空泵內(nèi)的大氣壓不高于0.1毫巴。

6、根據(jù)權(quán)利要求5的方法制備的檢測PVY病毒的免疫膠體金試紙條。