[發明專利]新生兒胎糞鉛含量的檢測方法

無效

• 申請號: 200710004148.2
• 申請日: 2007-01-07
• 公開（公告）號: CN101216420A
• 公開（公告）日: 2008-07-09
• 發明（設計）人: 霍霞;李燕;張原;徐錫金
• 申請（專利權）人: 汕頭大學醫學院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

應用微酸消化測定新生兒胎糞鉛含量的石墨爐原子吸收法

背景技術

鉛能通過胎盤屏障，引起胎兒發育尤其是神經系統發育異常。妊娠期鉛暴露可造成新生兒發育異常，尤其對神經系統的發育造成較大影響。因此檢測妊娠期鉛暴露水平，及早發現并預防鉛危害尤其重要。一般我們用檢測新生兒臍帶血鉛含量來反應妊娠期鉛暴露水平，但新生兒臍帶血鉛水平不能代表整個妊娠過程鉛的累積。胎糞主要來自通過胎兒消化道分泌的消化液、腸道脫落的上皮和胎兒吞咽的羊水及皮脂，從妊娠開始到出生后24小時，胎糞中鉛水平反應整個妊娠期間的新生兒腸道鉛暴露水平，所以檢測胎糞鉛水平可以反應整個妊娠期新生兒鉛的暴露水平。關于胎糞鉛檢測方法，未見有文獻報道。本發明參考有關文獻的組織消化方法，根據胎糞成分的特點，建立了快速準確的微酸消化測定胎糞鉛的石墨爐原子吸收方法。

發明內容

胎糞的成份包括胃腸分泌液、膽汁、胰液、各種消化酶、及吞咽羊水中不被吸收的胎脂、角化上皮細胞、腸內物質形成的鈣皂晶體、無機鹽類、以及脂肪、膽酸鹽、膽紅素等衍生物，相對組織來說，胎糞有機物比較少，無機物比較多，對胎糞上機檢測前的消化處理方面，必須針對胎糞自身的特點，找到一種合適的消化方法。

由于胎糞有機物比組織少，所以不能用消化組織的硝酸-硫酸-高氯酸體系，通過反復摸索，我們采樣微硝酸消化體系。高溫烘烤胎糞，然后用微硝酸消化胎糞，過氧化氫中和，稀釋后上機檢測。具體步驟是取約0.3g鮮濕胎糞于10ml消化管中，60℃烤箱烘烤過夜。烘干后加入0.5ml優級純的硝酸，80℃水浴1h(水浴起始溫度不宜太高，應由室溫緩慢升溫，以防溫度驟升引起劇烈反應)。待消化管中的胎糞消失，顏色轉為澄清透明的深黃色或紅棕色后，將消化管從水浴中拿出，在通風廚中打開蓋子，放凈棕紅色氣體，趁溶液保持一定的余溫，向管內滴加30％的雙氧水0.5ml，并不斷振蕩，溶液顏色轉淡。冷卻后用超純水定容至2ml，上機檢測。

檢測結果表明此種檢測方法簡便、快速、信號穩定、結果可靠。

附圖說明

圖1標準曲線

具體實施方式

1儀器及工作條件

儀器：日本島津AA-660型原子吸收分光光度計，GFA-4B石墨爐原子化器，ASC-60G自動進樣器，Eppendorf微量移液管，鉛空心陰極燈，石墨管(型號-206-69984日本島津公司)。

工作條件：波長283.3nm，狹寬1.0nm，工作電流10mA，BGC-d₂類型測量峰高，進樣體積10μL，水壓0.5kg/cm²，氣壓2.5kg/cm²，石墨爐加熱程序見表1。

表1石墨爐工作條件

Table?1.Furnace?programme

2標準溶液及試劑

從10ppm硝酸鉛標準儲備液(購自國家鋼鐵材料測試中心)中分別取0μL、100μL、200μL、400μL加入4個10ml容量瓶中，超純水定容至刻度，即為0.0μg/L、100μg/L、200μg/L、400μg/L的系列標準應用液。HNO₃為優級純。超純水為18.2MΩ.cm水。30％H₂O₂為分析純。

3樣品處理

取約0.3g鮮濕胎糞于10ml消化管中，60℃烤箱烘烤過夜。烘干后加入0.5ml優級純的硝酸，80℃水浴1h(水浴起始溫度不宜太高，應由室溫緩慢升溫，以防溫度驟升引起劇烈反應)。待消化管中的胎糞消失，顏色轉為澄清透明的深黃色或紅棕色后，將消化管從水浴中拿出，在通風廚中打開蓋子，放凈棕紅色氣體，趁溶液保持一定的余溫，向管內滴加30％的雙氧水0.5ml，并不斷振蕩，溶液顏色轉淡。冷卻后用超純水定容至2ml。

4結果

4.1基體改進劑的效果

胎糞的成份包括胃腸分泌液、膽汁、胰液、各種消化酶、及吞咽羊水中不被吸收的胎脂、角化上皮細胞、腸內物質形成的鈣皂晶體、無機鹽類、以及脂肪、膽酸鹽、膽紅素等衍生物，相對組織來說，胎糞有機物比較少，無機物比較多。無機成分較多會造成高背景的干擾，所以必須加基體改進劑以提高灰化溫度消除這種干擾。本實驗選用0.2％NH₄H₂PO₄溶液作基體改進劑，可提供灰化溫度，降低背景，而鉛信號幾乎沒有任何損失。此時，D₂校正可以滿足測定要求。