[發明專利]生物分子表面展示及其用途

有效

• 申請號: 200680054933.2
• 申請日: 2006-05-05
• 公開（公告）號: CN101460628A
• 公開（公告）日: 2009-06-17
• 發明（設計）人: 吉米·光;魯麗群
• 申請（專利權）人: 淡馬錫生命科學研究院有限公司
• 主分類號: C12N15/866
• 分類號: C12N15/866;A61K39/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司
• 代理人: 陶貽豐;武晶晶

技術領域

本發明通常涉及生物分子表面展示系統，以及展示作為疫苗的膜糖蛋 白的特定應用。具體而言，本發明涉及治療和/或預防禽流感的方法、疫苗、 免疫組合物和試劑盒，以及涉及調節對禽流感病毒的免疫應答的相關方 法。更具體而言，本發明涉及用于治療和/或預防毒株H5N1禽流感病毒的 方法、疫苗、免疫組合物和試劑盒，以及涉及用于調節對毒株H5N1禽流 感病毒的免疫應答的方法。

背景技術

禽流感病毒是重大的世界性的鳥類傳染病，其是由流感病毒的A型毒 株引起的。所有鳥類被認為容易感染該疾病，這可產生從輕微發病到高度 接觸傳染范圍內的癥狀以及迅速致命的發病機理，導致嚴重的流行病。

已知15種流感病毒亞型傳染鳥類，因此在鳥群內提供了廣泛的流感病 毒貯存宿主。具體而言，因為候鳥對傳染具有天生抵抗力，因此它們對傳 染其他鳥群，諸如特別容易感染迅速致命流感流行病的家禽，提供了有力 的載體。高致病形式的所有爆發都是由亞型H5和H7的流感A病毒引起。

受染地區的檢疫以及受染或暴露群體的毀滅是針對防止禽流感病毒傳 播的標準程序。然而，此類措施不僅受阻于高接觸傳染性、易于傳播性以 及病毒在其天然宿主體外的長期穩定性，而且就實施此類措施以及對鳥類 的毀滅而言，它們還導致巨大的經濟代價。

1997年在香港，禽流感病毒的H5N1毒株從鳥類直接轉移到人，在18 個人身上引發嚴重的呼吸系統疾病，其中6人死亡。此次傳染與由相同毒 株引起的禽流感病毒的香港家禽種群流行病同時爆發。2003年的另一次爆 發引發2例并且1人死亡。人類感染禽流感病毒的進一步病例已經在幾個 國家觀察到，包括荷蘭、越南和中國。另外，鳥類感染H5N1毒株的最近 爆發已經在東歐特別是土耳其進行了報道。

H5N1受到特別關注，原因在于其迅速突變并擅長從感染其他動物種類 的病毒捕獲基因。另外，來自H5N1的分離株具有高致病性并且能夠在人 身上引發嚴重的疾病。從感染中幸存的鳥類經口以及通過糞便排泄病毒至 少10天，從而促進了活家禽市場上以及通過候鳥的進一步傳播。

有關人感染H5N1禽流感病毒的臨床進展的數據非常有限，并且抗病毒 藥——其中僅有一些可以被用于治療和預防——也具有局限性。

本發明基于生物分子表面展示系統的開發，以及此類系統展示作為疫 苗的膜糖蛋白的特定應用。具體而言，本發明涉及治療和/或預防禽流感的 方法、疫苗、免疫組合物和試劑盒，以及涉及用于調節對禽流感病毒的免 疫應答的相關方法。

發明內容

根據本發明的第一方面，提供用于呈遞或展示多肽的方法，其中所述 方法包括：

(a)將編碼所述多肽的核酸插入桿狀病毒表達載體中，其中所述桿狀病 毒表達載體包括來自白斑綜合癥病毒的iel啟動子；

(b)用所述表達載體轉染至少一種宿主細胞；和

(c)從所述表達載體中表達所述多肽，其中所述多肽被呈遞或展示在桿 狀病毒的表面膜上。

根據本發明的第二方面，提供用于呈遞或展示多肽的系統，其中所述 系統包括：

(a)編碼所述多肽的核酸，其被插入桿狀病毒表達載體中，其中所述桿 狀病毒表達載體包括來自白斑綜合癥病毒的iel啟動子；

(b)用所述表達載體轉染至少一種宿主細胞的方法；和

(c)用于從所述表達載體表達所述多肽的方法，其中所述多肽被呈遞或 展示在桿狀病毒的表面膜上。

根據本發明的第三方面，提供用于治療或預防受治療者疾病的疫苗， 其中所述疾病與禽流感病毒有關，并且其中所述疫苗包括含有編碼血凝素 肽的核酸的表達載體，使得在使用時所述血凝素肽通過所述表達載體在所 述受治療者中表達。

受治療者可以是人、禽或豬。

禽流感病毒可以是禽流感病毒的H5N1亞型。

表達載體可以包括桿狀病毒表達載體。所述桿狀病毒表達載體可以是 含有水泡性口膜炎病毒糖蛋白的假性病毒載體。

表達載體可以進一步包括啟動子。所述啟動子可以包括來自白斑綜合 癥病毒的iel啟動子。該啟動子可以可操作連接至編碼抗原肽的核酸。

血凝素肽可以包括來源于禽流感病毒的H5N1亞型的氨基酸序列。