[發明專利]環狀抗微生物肽

有效

• 申請號: 200680053281.0
• 申請日: 2006-12-21
• 公開（公告）號: CN101389642A
• 公開（公告）日: 2009-03-18
• 發明（設計）人: D·奧尼爾
• 申請（專利權）人: 諾瓦生命科學有限公司
• 主分類號: C07K7/64
• 分類號: C07K7/64;C07K14/47;A61K38/12;A61K38/17
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司
• 代理人: 曹津燕;郭廣迅

發明領域

本發明涉及環狀陽離子肽及其在治療微生物感染中的應用。?

發明背景?

抗微生物肽(AMP)形成了真核生物免疫性的基礎，并且提供了抵抗微生物破壞皮膚和粘膜表面的第一道防線。天然的AMP的例子包括防御素以及cathelicidin肽家族。這些AMP的長度、序列及結構各異，但它們最主要的共同點在于分子小，帶陽離子凈電荷以及兩性結構。也已經從多種細菌、真菌、植物、無脊柱動物和脊柱動物中分離出小的、陽離子抗微生物肽，因此抗微生物肽看來也在原核生物的防御中發揮了作用。?

天然的AMP表現出抗革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性細菌、酵母、真菌以及包膜病毒的廣譜活性。病原微生物看來沒有獲得對這些陽離子肽的抗性，而且同樣地，AMP已經保守地作為重要的天然免疫宿主防御分子經歷了幾千年的演化。因此不難理解，AMP已經成為用于多種感染的治療劑的潛在研究目標。然而，AMP面臨著技術上的挑戰，并且其在重組系統生產的成本高，具有強效的趨化作用和炎性生物學功能，這些都阻礙了天然的AMP成為治療劑。?

在我們的共同未決申請中，我們已經表明富含某些堿性殘基，如賴氨酸或精氨酸的線性肽具有抗微生物活性，特別是抗真菌活性。然而，仍然還需要能夠用于治療和預防微生物感染的藥物。?

發明內容

根據本發明的第一個方面，其中提供了包含2至約200個D和/或L-氨基酸的肽，所述氨基酸可以是相同的或不同的，選自疏水性氨基酸和/或陽離子氨基酸，并且其中的肽是環狀的。該環狀肽可以包含3至約100個D和/或L-氨基酸，例如3至50個D和/或L-氨基酸，包含4至約50個D和/或L-氨基酸。?

本發明的肽可以用于預防和治療微生物感染。?

由于本發明的環狀肽的有效性高，對蛋白水解穩定，對鹽實質上不敏感，無肝毒性，無溶血作用并且易于合成，因此它們有希望作為治療劑。?

本發明的肽的陽離子電荷被認為可以促進肽與微生物膜上的極性頭部基團結合。通過環化使帶電基團以更加密集的形式(confirmation)得到穩定，相信這樣增強了這種吸引從而增強肽的抗微生物作用。?

在本發明更具體的方面中，提供了包含根據式I的氨基酸的肽：?

((X)_l(Y)_m)_n????(I)?

其中l和m為0至10的整數，但l和m不能都為0；n為1至10的整數；X和Y可以是相同或不同的，為選自疏水性氨基酸和/或陽離子氨基酸的氨基酸，并且作為藥物使用的該肽為環狀肽。?

肽可以包含2至50個氨基酸，例如3、4、5、6或7直到50個氨基酸，包括3、4、5、6或7直到10、15、20、25、30、35、40、45或50個氨基酸。?

在本發明的優選方面中，肽包含2至15個氨基酸，例如3到15個氨基酸。優選地，肽包含5至13個氨基酸。進一步優選的是包含3至7個氨基酸，例如7個氨基酸的肽。?

正如技術人員所知的，主要根據氨基酸側鏈的化學和物理性質，可以將氨基酸分為不同的種類。例如，一些氨基酸通常被認為是親水性或極性氨基酸，而其它的則被認為是疏水性或非極性氨基酸。疏水性氨基酸可以選自包括甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丙氨酸、色氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、酪氨酸以及蘇氨酸的疏水氨基酸組；陽離子氨基酸可以選自鳥氨酸、組氨酸、精氨酸和賴氨酸。本發明使用的術語“疏水性”和“陽離子的”是指疏水性大于或等于-1.10和/或依據Fauchere和Pliska?Eur.J.Med?Chem.10∶39，1983所描述的方法，凈電荷大于或等于0的氨基酸。疏水性或非極性氨基酸也可以是指具有在生理pH下不帶電荷的非極性側鏈的氨基酸，并且該側鏈通常與水溶液不相容。氨基酸可以是天然的或合成的。?

在本發明的優選方面中，X和/或Y為選自組氨酸、鳥氨酸、精氨酸和賴氨酸的陽離子氨基酸。優選的X和/或Y為精氨酸或賴氨酸。?

X和/或Y可以是本發明定義的疏水性氨基酸或陽離子氨基酸的光學異構體，如D或L-氨基酸。優選的X和/或Y為D-氨基酸。?

在本發明的優選方面中，式I所示的肽包含至少90％，例如至少95％，如97-99％，或者甚至100％的D-氨基酸。?

在本發明的優選方面中，式I所示的肽包含至少90％，例如至少95％，如97-99％，或者甚至100％的L-氨基酸。?