[發明專利]基于液相色譜法的分析方法及裝置

有效

• 申請號: 200680052620.3
• 申請日: 2006-02-09
• 公開（公告）號: CN101379393A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發明（設計）人: 林守正;早川禎宏
• 申請（專利權）人: 株式會社島津制作所
• 主分類號: G01N30/30
• 分類號: G01N30/30;G01N30/54
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司
• 代理人: 李貴亮

技術領域

本發明涉及一種液相色譜法，將分析試料與流動相一齊導入分離柱，并通過檢測器檢測由該柱分離后洗脫出的試料的成分。?

背景技術

液相色譜法(liquid?chromatography)作為分析試料成分的分析技術正得到廣泛應用。液相色譜法是利用物質相對于固定相與流動相(mobilephase)的這兩相的分布狀態的差別進行分離的方法，所述固定相形成在柱填充劑表面上或在毛細管內面上，所述流動相流經填充材料或毛細管柱的間隙，試料中的各成分根據其化學性質以不同的速度流過分離柱。?

在對化學性質相互相差甚遠的多種物質一齊進行分析時，分析所需要的時間會變長，但是由于若流動相的組成變化則物質的分布狀態變化，通常采用使流動相組成隨時間改變并在維持分離狀態的同時縮短分析時間的流動相組成梯度洗脫法。?

圖4中表示使用了流動相組成梯度洗脫法的液相色譜儀。?

在用于輸送流動相1a、1b的流動相送液流路2a、2b上分別設置有送液泵5a、5b。送液泵5a、5b通過控制電動機的轉速來調節送液量。流動相送液流路2a、2b在混合器11處進行合流，混合器11將流動相1a、1b混合后輸送到分析流路12。在分析流路12中隔著試料注入部7設置有分離柱(separation?column)15，并在柱15的下游設置有檢測器19。?

自試料注入部7注入的試料通過由混合器11混合后的流動相而被導入分離柱15中，按每個成分進行分離，由檢測器19檢測分離后的試料成分。?

送液泵5a、5b通過控制裝置21控制各自的送液量，并按照用于實現梯度洗脫法的規定的送液程序來改變送液量。?

在這種液相色譜儀中，例如，如圖5所示，從流動相A為100％、流? 動相B為0％的送液狀態開始分析，以漸漸地減小流動相A的濃度、增加流動相B的濃度的方式來改變流動相組成，最終使流動相A為0％、流動相B為100％，從而一邊改變柱15中試料的保持力一邊進行分析。尤其，這樣使用多個送液泵在送液泵的下游側將多個流動相合流的梯度方式被稱為高壓梯度方式(例如參照專利文獻1)。并且，在圖5中，縱軸的A、B坐標分別表示A液100％、B液100％。橫軸為時間。?

但是，在流動相組成梯度洗脫法中，由于檢測器感應流動相的組成變化會引起基線的變動，所以，根據流動相的條件或檢測方法有不能適用于分析的情況。?

另外，僅使用流動相組成梯度洗脫法存在不能充分達到其目的的情況。?

另一方面，由于溫度也會使物質的分布狀態改變，作為代替流動相組成梯度洗脫法的方法，提出了使柱周邊的溫度隨時間改變的溫度梯度洗脫法(例如參照非專利文獻1)。在此方法中，通過從外部改變柱溫度來改變柱內的流動相溫度。?

但是，在此方法中，由于因熱介質的熱容量、熱介質或柱管材質的導熱率及溫度差而導熱性變化，所以難以迅速且準確地使溫度改變。而且，也有沿柱剖面方向產生溫度梯度而易于引起峰形劣化的問題。因此，此提案的溫度梯度洗脫法未得到廣泛普及。?

專利文獻1：特開2003-98166號公報?

非專利文獻1：金澤秀子，“溫度響應性色譜法”分析，2004年6月號，第303～308頁?

發明內容

本發明的目的是提供一種快速且準確的溫度梯度洗脫法。?

本發明著眼于若將不同溫度的流動相任意地進行混合則能迅速地實現溫度調節，并且將流動相在2條流路中調節成相互不同的恒定溫度，以任意的混合比將其混合后使其流入被絕熱的柱來實現目的。?

即，本發明的基于液相色譜法的分析方法，將所要分析的試料與流動相一齊導入至分離用柱，并將在該柱中分離并洗脫出的試料成分用檢測器 進行檢測，該基于液相色譜法的分析方法包括如下步驟，以進行溫度梯度洗脫法：使柱處于絕熱狀態；從2條流動相送液流路供給流動相，在混合后導入至柱中，此時，將一條流動相送液流路的流動相溫度設定成比在柱中想要調節的溫度范圍的上限溫度高的恒定溫度，并將另一條流動相送液流路的流動相溫度設定成比在柱中想要調節的溫度范圍的下限溫度低的恒定溫度；和通過調節2條流動相送液流路的流量，使流動相的混合比率隨時間變化，從而使柱內的流動相的溫度隨時間變化。?