[發明專利]環核苷酸測定方法

無效

• 申請號: 200680052453.2
• 申請日: 2006-12-06
• 公開（公告）號: CN101365721A
• 公開（公告）日: 2009-02-11
• 發明（設計）人: S·A·高利;肖圭玄;M·庫馬;J·維度吉里尼
• 申請（專利權）人: 普羅梅格公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00;C12P21/08
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 陳軼蘭

1.測定樣品中環核苷酸量的方法，包括：

a)提供可能含有環核苷酸的樣品，

b)向所述樣品中加入能被所述環核苷酸活化的無活性酶，

c)加入能檢測所述被活化的酶的活性并產生可檢測信號的檢測 系統，及

d)基于所述信號測定存在于所述樣品中的環核苷酸的量。

2.權利要求1的方法，其中所述樣品包含裂解物。

3.權利要求2的方法，其中所述裂解物來自真核細胞。

4.權利要求1的方法，其中所述樣品包含質膜。

5.權利要求1的方法，其中所述環核苷酸是cAMP或cGMP。

6.權利要求1的方法，其中所述無活性酶是依賴于cAMP的蛋白 激酶或依賴于cGMP的蛋白激酶。

7.權利要求1的方法，其中所述檢測系統包括能被依賴于cAMP 的蛋白激酶或依賴于cGMP的蛋白激酶磷酸化的底物。

8.權利要求7的方法，其中所述底物包含SEQ?ID?NO：1。

9.權利要求7的方法，其中所述檢測系統進一步包括能利用ATP 產生發光信號的酶。

10.權利要求9的方法，其中所述酶是螢光素酶。

11.權利要求7的方法，其中所述底物包括放射性標記的生物素化 底物。

12.權利要求11的方法，其中所述底物進一步包含SEQ?ID?NO：1。

13.權利要求11的方法，其中所述檢測系統進一步包括鏈霉抗生 物素結合表面。

14.權利要求7的方法，其中所述底物包括熒光標記的底物。

15.權利要求14的方法，其中所述底物進一步包含SEQ?ID?NO：1。

16.權利要求14的方法，其中所述熒光標記是羅丹明部分。

17.權利要求1的方法，進一步包括添加一種或多種磷酸二酯酶抑 制劑。

18.權利要求1的方法，進一步包括添加能影響所述樣品中環核苷 酸量的激動劑或拮抗劑。

19.權利要求18的方法，其中所述激動劑或拮抗劑調節腺苷酸環 化酶活性。

20.權利要求18的方法，其中所述激動劑或拮抗劑調節G蛋白偶 聯受體活性。

21.權利要求18的方法，其中所述激動劑或拮抗劑調節磷酸二酯 酶活性。

22.測定樣品中腺苷酸環化酶活性的方法，包括：

a)提供可能含有腺苷酸環化酶的樣品，

b)向所述樣品中加入能被cAMP活化的無活性酶，

c)加入能檢測所述被活化的酶的活性并產生可檢測信號的檢測 系統，及

d)基于所述信號測定存在于所述樣品中的腺苷酸環化酶活性。

23.權利要求22的方法，其中所述樣品包含裂解物。

24.權利要求23的方法，其中所述裂解物來自真核細胞。

25.權利要求22的方法，其中所述樣品包含質膜。

26.權利要求22的方法，其中所述無活性酶是依賴于cAMP的蛋白 激酶。

27.權利要求22的方法，其中所述檢測系統包括能被依賴于cAMP 的蛋白激酶磷酸化的底物。

28.權利要求27的方法，其中所述底物包含SEQ?ID?NO：1。

29.權利要求27的方法，其中所述檢測系統進一步包括能利用ATP 產生發光信號的酶。

30.權利要求29的方法，其中所述酶是螢光素酶。