[發明專利]用于鑒定細胞信號轉導調節物的方法

有效

• 申請號: 200680051956.8
• 申請日: 2006-11-30
• 公開（公告）號: CN101336293A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發明（設計）人: Y·初
• 申請（專利權）人: 可塑細胞有限公司
• 主分類號: C12N15/06
• 分類號: C12N15/06;G01N33/50
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 梁謀;劉玥

1.?一種用于鑒定細胞信號轉導途徑的抑制劑或者促進劑的潛在調節物的方法，所述方法包括以下步驟：

(a)提供不是得自人胚胎或胎兒的胚胎干細胞，其中所述胚胎干細胞能夠經由與體內的祖細胞群細胞基本相同的祖細胞分化為第二種細胞類型；通過使所述胚胎干細胞序貫暴露于兩種或更多種培養條件從而由胚胎干細胞獲得所述祖細胞，其中所述培養條件是指摻入培養基中并影響生長和/或分化的特定物質；

(b)使獲得的祖細胞暴露于所述潛在調節物；和

(c)監測分化情況，以確定第二種細胞類型的形成。

2.權利要求1的方法，其中所述胚胎干細胞被修飾以使其進行擴增。

3.權利要求1的方法，其中所述胚胎干細胞為自我更新干細胞。

4.權利要求1的方法，其中所述步驟(a)是針對作為細胞單元組成部分的細胞進行的。

5.權利要求4的方法，其中所述細胞單元包括微載體或其它支持物。

6.權利要求1的方法，其中所述培養條件包括篩選細胞信號轉導途徑的抑制劑或者促進劑的潛在調節物。

7.權利要求1的方法，其中所述祖細胞為沿著干細胞和分化細胞類型之間的分化途徑停滯的細胞。

8.權利要求1的方法，其中所述胚胎干細胞為原初細胞。

9.權利要求1的方法，其中通過調節細胞信號轉導和/或細胞中一種或多種基因的表達使胚胎干細胞分化為第二種細胞類型。

10.權利要求9的方法，其中細胞中的基因表達調節包括將所述一種或多種基因轉染入所述細胞中，或者其中基因表達的調節包括外源給予基因產物。

11.權利要求1的方法，其中細胞的分化通過觀測細胞表型或通過檢測細胞中一種或多種基因表達的調節來監測，由此確定所述細胞的分化狀態。

12.權利要求11的方法，其中觀測一種或多種報告基因的表達調節，其中所述報告基因對應于所述細胞的一種或多種分化狀態。

13.權利要求11或權利要求12的方法，其中所述一種或多種基因編碼標記。

14.權利要求13的方法，其中所述標記可通過免疫測定檢測。

15.權利要求1的方法，其中所述細胞的分化通過增殖能力的喪失來監測。

16.權利要求1的方法，其中所述潛在調節物包括有機小分子或無機小分子。

17.權利要求1的方法，其中所述潛在調節物包括天然或衍生化的糖、蛋白質、核酸或蛋白質-核酸。

18.權利要求17的方法，其中所述蛋白為肽或糖蛋白。

19.權利要求17的方法，其中所述蛋白為多肽。

20.權利要求17的方法，其中所述核酸為DNA或RNA。

21.權利要求17的方法，其中所述核酸為寡核苷酸。

22.權利要求1的方法，其中所述潛在調節物得自具有藥物樣特性的小分子文庫。

23.一種用于鑒定細胞信號轉導途徑的抑制劑或者促進劑的調節物的方法，所述方法包括使用祖細胞，所述方法包括通過使不是得自人胚胎或胎兒的胚胎干細胞序貫暴露于兩種或更多種培養條件從而由胚胎干細胞獲得所述祖細胞，其中所述培養條件是指摻入培養基中并影響生長和/或分化的特定物質，其中所述胚胎干細胞能夠經由所述祖細胞分化為第二種細胞類型，其中所述祖細胞與體內的祖細胞群細胞基本相同。

24.權利要求23的方法，其中所述調節物為再生藥物。

25.與體內的祖細胞群細胞基本相同的祖細胞在藥物篩選測定中用于鑒定細胞信號轉導途徑的抑制劑或促進劑的調節物的用途，其中通過使不是得自人胚胎或胎兒的胚胎干細胞序貫暴露于兩種或更多種培養條件從而由胚胎干細胞獲得所述祖細胞，其中所述培養條件是指摻入培養基中并影響生長和/或分化的特定物質，其中所述胚胎干細胞能夠經由所述祖細胞分化為第二種細胞類型。

26.權利要求25的用途，其中所述調節物為再生藥物。