[發(fā)明專利]用于發(fā)酵和培養(yǎng)的方法、植物發(fā)酵提取物、植物發(fā)酵提取物組合物、用于制備脂多糖的方法和脂多糖

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680051474.2
• 申請日: 2006-11-28
• 公開（公告）號: CN101360829A
• 公開（公告）日: 2009-02-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杣源一郎;河內(nèi)千惠;稻川裕之;西澤孝志
• 申請（專利權(quán)）人: 杣源一郎;生物醫(yī)學(xué)研究集團有限公司
• 主分類號: C12P1/04
• 分類號: C12P1/04;A23L1/30;A61K31/739;A61K35/74;A61P37/04;C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 羅菊華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于通過包含免疫增強劑的可食革蘭氏陰性菌發(fā)酵的 方法，所述細(xì)菌當(dāng)加入用于植物和動物的藥物、準(zhǔn)藥物、化妝品、功 能性食物、飼料、肥料和沐浴劑中時是安全的，所述動物如哺乳動物 (特別地家畜和寵物動物)包括人類、鳥類(特別是家雞和寵物鳥類)、 兩棲動物、爬行動物、魚類(特別是寵物魚類)和無脊椎動物，包含 通過發(fā)酵獲得的免疫增強劑的培養(yǎng)溶液，和通過使免疫增強劑濃縮獲 得的提取物。

背景領(lǐng)域

對于哺乳動物(特別地家畜和寵物動物)包括人類、鳥類(特別 是家雞和寵物鳥類)、兩棲動物、爬行動物、魚類(特別是寵物魚類) 和無脊椎動物以及植物，建立用于預(yù)防或治療疾病的方法包括感染防 護(hù)技術(shù)是緊迫的問題。此外，為了實現(xiàn)這點，非常需要其中不使用化 學(xué)藥品、不發(fā)生環(huán)境污染、不發(fā)生抗藥菌和不在人體中發(fā)生累積的方 法。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)對于上述問題，衍生自天然產(chǎn)物的免疫增強劑安 全地實現(xiàn)關(guān)于預(yù)防和治療疾病的作用(非專利文獻(xiàn)1)。作為其的一 個例子，可以使用得自成團泛菌(Pantoea?agglomerans)的脂多糖， 所述成團泛菌是小麥中的常住菌(非專利文獻(xiàn)1)。已知鱟陽性糖脂 具有強免疫增強活性(非專利文獻(xiàn)2)。所謂的脂多糖也包括在這個 類別中。脂多糖已知是革蘭氏陰性菌細(xì)胞外壁的主要組分以及 Coley′s疫苗接種的主要成分之一，且具有有效的免疫增強活性(非 專利文獻(xiàn)3)。

本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)鱟陽性糖脂存在于小麥中，其的部分是小麥共生 細(xì)菌的脂多糖，并且這些強烈激活天然免疫性(非專利文獻(xiàn)4)。上 文2種通過經(jīng)皮或口部施用安全且強烈地激活天然免疫性，并且顯示 出用于預(yù)防和治療廣泛多樣疾病包括傳染病的作用(非專利文獻(xiàn)5)。 此外，本發(fā)明人已報道衍生自成團泛菌的脂多糖含量不僅通過用成團 泛菌使小麥粉發(fā)酵得到增加，所述成團泛菌是小麥粉中的常住菌，而 且其為包含衍生自小麥的組分的新型免疫增強劑的發(fā)酵的小麥提取物 發(fā)揮感染防護(hù)效果，作為代替畜牧業(yè)和水產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域中的抗生素化學(xué)藥 品的安全和可靠的天然材料。

脂多糖的基本結(jié)構(gòu)由稱為脂質(zhì)A的脂質(zhì)和與之共價結(jié)合的各種糖 (多糖)組成。脂質(zhì)A后的區(qū)域由R核隨后為O抗原多糖部分組成， 所述R核在相關(guān)細(xì)菌中采取相對一致的結(jié)構(gòu)，所述O抗原多糖部分取 決于細(xì)菌種類采取不同結(jié)構(gòu)(非專利文獻(xiàn)7)。O抗原也具有相同寡糖 的重復(fù)結(jié)構(gòu)，其表征LPS(脂多糖)(非專利文獻(xiàn)1)。因此，脂多糖 一般形成具有多重分子量的混合物。還已知取決于脂多糖衍生自其的 微生物脂多糖具有不同結(jié)構(gòu)。例如，衍生自沙門菌屬(Salmonella) 的脂多糖和衍生自大腸桿菌(Escherichia?coli)的脂多糖在結(jié)構(gòu)以 及生物活性方面不同。然而，因為一般不易于確定脂多糖的結(jié)構(gòu)，所 以衍生自革蘭氏陰性菌的脂多糖的結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)節(jié)未知。因此，描 述基于功能差異脂多糖一般具有新型結(jié)構(gòu)。

同時，在近期研究中已證實脂多糖經(jīng)由TLR4激活天然免疫性(非 專利文獻(xiàn)6)。已發(fā)現(xiàn)脂多糖的脂質(zhì)A部分是與TLR4結(jié)合所需的，和 多糖部分在很大程度上影響TLR4的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率。根據(jù)上 文，推測脂多糖的細(xì)胞應(yīng)答中的差異指示結(jié)構(gòu)差異。

證實脂多糖的經(jīng)皮或口部施用是可靠和安全的對于確定脂多糖的 有用性是重要的。因此，照慣例著重在食物生產(chǎn)和發(fā)酵中使用的革蘭 氏陰性菌。即，如果鱟陽性糖脂和脂多糖存在于在食物生產(chǎn)中使用的 革蘭氏陰性菌中，且作為可食產(chǎn)物與發(fā)酵產(chǎn)物一起提供，那么這個事 實證實鱟陽性糖脂和脂多糖具有被食用的經(jīng)驗。這是強烈指出鱟陽性 糖脂和脂多糖的經(jīng)皮或口部施用是可靠和安全的發(fā)現(xiàn)，并且同時使用 這些物質(zhì)應(yīng)使得能夠開發(fā)新衛(wèi)生保健產(chǎn)品和藥物如化妝品和食物。

非專利文獻(xiàn)1：Chie?Kohchi等人，″Natural?immunity?regulatory action?of?fermented?wheat?extract，”New?Food?Industry(2006) 第48卷，第19-27頁

非專利文獻(xiàn)2：Ulmer，A.J.等人，″Lipopolysaccharide： Structure，Bioactivity，Receptors，and?Signal?Transduction.” Trends?in?Glycoscience?and?Glycotechnology，(2002)第14卷， 第53-68頁