[發明專利]用于遞送和表達抗原的促凋亡細菌和組合物

無效

• 申請號: 200680051051.0
• 申請日: 2006-11-15
• 公開（公告）號: CN101548015A
• 公開（公告）日: 2009-09-30
• 發明（設計）人: D·S·克諾德爾
• 申請（專利權）人: 范德比爾特大學;由退伍軍人事務部代表的美國政府
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12N1/21
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 陳軼蘭

1.修飾細菌以增強所述細菌的免疫原性的方法，其包括遺傳上改 變所述細菌以表達抗凋亡酶的顯性失活突變體，由此所述細菌在受試 者中具有增強的免疫原性。

2.經修飾的細菌，其依照權利要求1的方法制備。

3.免疫原性組合物，其包含權利要求2的經修飾的細菌。

4.修飾減毒細菌以增強所述減毒細菌的免疫原性的方法，其包括 遺傳上改變所述細菌以表達抗凋亡酶的顯性失活突變體，由此所述細 菌在受試者中具有增強的免疫原性。

5.權利要求1和4的方法，其中所述細菌選自結核分枝桿菌、牛 分枝桿菌、牛分枝桿菌菌株BCG、BCG亞株、鳥分枝桿菌、胞內分枝桿 菌、非洲分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、潰瘍分枝桿菌、 鳥分枝桿菌副結核亞種、星狀諾卡氏菌、其他諾卡氏菌屬物種、嗜肺 軍團菌、其他軍團菌屬物種、傷寒沙門氏菌、其他沙門氏菌屬物種、 志賀菌屬物種、鼠疫耶爾森氏菌、溶血巴斯德菌、多殺巴斯德菌、其 他巴斯德菌屬物種、胸膜炎肺炎放線桿菌、單核細胞增生李斯特氏菌、 依氏李斯特氏菌、流產布魯桿菌、其他布魯桿菌屬物種、反芻類考德 里氏體、肺炎衣原體、沙眼衣原體、鸚鵡衣原體、伯氏柯克斯體、其 他立克次氏體屬物種、埃里希氏體屬物種、金黃色葡萄球菌、表皮葡 萄球菌、釀膿鏈球菌、無乳鏈球菌、炭疽桿菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、 彎曲桿菌屬物種、腦膜炎奈瑟氏球菌、淋病奈瑟氏球菌、銅綠假單胞 菌、其他假單胞菌屬物種、流感嗜血桿菌、杜氏嗜血桿菌、其他嗜血 桿菌屬物種、小腸結腸炎耶爾森氏菌、及其他耶爾森氏菌屬物種。

6.權利要求1和4的方法，其中所述顯性失活突變體是SodA的 顯性失活突變體，其中天然存在的核酸中的核苷酸缺失、插入和/或置 換編碼干擾所述生物的SOD活性的分子。

7.權利要求1和4的方法，其中所述顯性失活突變體是谷氨酰胺 合酶的顯性失活突變體，其中天然存在的核酸中的核苷酸缺失、插入 和/或置換編碼干擾所述生物的谷氨酰胺合酶活性的分子。

8.權利要求6和7的方法，其中所述細菌是BCG。

9.權利要求8的方法，其包括進一步的促凋亡修飾。

10.權利要求9的方法，其中所述進一步的促凋亡修飾包含選自 SigH的失活、sigE的失活、SecA2的失活、硫氧還蛋白的失活、硫氧 還蛋白還原酶的失活和谷氧還蛋白的失活的一種或多種修飾。

11.權利要求8的方法，其中所述顯性失活突變體是具有在第28 位上的組氨酸和第76位上的組氨酸缺失的突變體SodA。

12.權利要求8的方法，其中所述顯性失活突變體是具有在第28 位上的組氨酸或第76位上的組氨酸缺失的突變體SodA。

13.權利要求8的方法，其中所述顯性失活突變體是具有在第54 位上的谷氨酸缺失的突變體SodA。

14.權利要求8的方法，其中所述顯性失活突變體是具有在第54 位上的谷氨酸缺失和第28位上用精氨酸置換組氨酸的突變體SodA。

15.權利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述細菌包含 SodA的顯性失活突變體和sigH的活性降低突變。

16.權利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述細菌包含 SodA的顯性失活突變體和secA2的活性降低突變。

17.權利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述細菌包含 SodA的顯性失活突變體、sigH的活性降低突變和secA2的活性降低突 變。

18.權利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述細菌包含 SodA的顯性失活突變體、glnAl的顯性失活突變體、sigH的活性降低 突變和secA2的活性降低突變。

19.權利要求8的方法，其中所述細菌包含glnAl的顯性失活突 變。