[發(fā)明專利]用于測定分析物中的靶分子的量的傳感裝置和方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680048906.4
• 申請日: 2006-12-22
• 公開（公告）號: CN101346631A
• 公開（公告）日: 2009-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: E·R·福森納爾;A·H·J·伊明克
• 申請（專利權(quán)）人: 皇家飛利浦電子股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/58;G01N35/00;C07K16/42
• 代理公司: 永新專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 林曉紅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于檢測分析物組合物中的靶分子的方法以及適用于該方法的傳感裝置。本發(fā)明特別涉及其中使用了磁性標(biāo)記和適當(dāng)?shù)拇艂鞲醒b置的方法。

背景技術(shù)

在診斷學(xué)領(lǐng)域，特別是在生物醫(yī)學(xué)診斷學(xué)領(lǐng)域，例如醫(yī)學(xué)和食品診斷學(xué)領(lǐng)域中，生物傳感器或生物芯片的應(yīng)用是公知的。這些生物傳感器和芯片通常以生物芯片的微陣列的形式使用，使得能夠?qū)Π蟹肿永缟锓肿尤鏒NA、RNA、蛋白質(zhì)、酶、激素、藥物進(jìn)行分析。許多類型的檢測法和檢測系統(tǒng)都被用于目前可用的傳感器中。通常，將標(biāo)記用于檢測。標(biāo)記的實(shí)例有光標(biāo)記、彩珠、熒光化學(xué)基團(tuán)、條形碼或磁性標(biāo)記。

例如，GB-A-2404022公開了甲基苯丙胺類藥物例如Ecstacy的檢測。該文獻(xiàn)公開了競爭性檢測法，其包括：

a)用(i)假麻黃堿/載體綴合物(其中假麻黃堿經(jīng)其羥基與所述載體相連接)和(ii)能夠結(jié)合一或多種甲基苯丙胺類藥物以及所述綴合物的抗體接觸包括待鑒定藥物的樣品；和

b)測定所述樣品的存在是否減少了所述抗體與所述綴合物的結(jié)合，結(jié)合的減少指示所述樣品含有甲基苯丙胺類藥物。所述抗體可以包括可檢測標(biāo)記例如可檢測酶如辣根過氧化物酶。

該方法的其中一個缺點(diǎn)是靶分子或者具有相同的結(jié)合特性的分子(假靶)需要與載體結(jié)合。因此，對于每種待分析的新靶而言，不同的分子都需要固定在載體上。結(jié)合過程是一個復(fù)雜的過程，這可能對于其他靶或假靶有著顯著的不同。這是開發(fā)通用傳感器的主要障礙。

因此，本發(fā)明的一個目的是提供能夠使用通用傳感器表面且無需因?yàn)槊糠N待分析的新靶而修飾傳感器表面的方法和裝置。

當(dāng)使用磁傳感器時，這個缺陷特別突出。由于檢測磁場中的變化的潛在機(jī)制，在這種傳感器中需要將磁性標(biāo)記與傳感器表面接合。唯一可能的是直接結(jié)合或通過提供經(jīng)其他分子與傳感器表面的連接的間接結(jié)合。希望傳感器表面是通用傳感器表面，其可以用于分析多種靶。這將避免當(dāng)每次測定新靶時需要修飾所述表面。

本發(fā)明克服了這些缺陷中的至少一些缺陷。

發(fā)明內(nèi)容

已經(jīng)出乎意料地發(fā)現(xiàn)，如果不是將分析物或假靶固定于傳感器表面上，而是用分析物結(jié)合分子覆蓋傳感器表面時，將產(chǎn)生更通用的傳感器表面。

因此，本發(fā)明的一個方面涉及一種利用傳感裝置檢測靶分子的方法，其中所述方法包括：

a)提供用于測定分析物組合物中至少一種類型的靶的濃度的傳感裝置，

所述傳感裝置包括至少一個傳感表面，

所述表面具有與之相連的至少一種初級捕獲分子(primary?capturemolecule)，所述初級捕獲分子是抗體或能夠與抗體結(jié)合的分子，

所述傳感裝置還包括傳感元件，

b)用所述傳感表面接觸所述分析物組合物；

c)任選地提供液體形式的特異性結(jié)合靶分子的次級靶分子，

d)提供包括標(biāo)記的抗獨(dú)特型抗體的組合物，

e)檢測由所述標(biāo)記提供的信號，其中所述傳感裝置是磁傳感器，所述標(biāo)記是磁性標(biāo)記。

本發(fā)明的另一方面涉及適用于這一方法的傳感裝置以及用于這一方法中的系統(tǒng)和試劑盒。

附圖說明

圖1顯示了本發(fā)明的一個實(shí)施方式，其中特異于靶分子的抗體被固定于傳感器表面上。

圖2顯示了一個實(shí)施方式，其中通用捕獲分子附著于傳感器表面。

發(fā)明詳述

除非特別說明，當(dāng)使用表示單數(shù)名詞的不定冠詞或定冠詞例如“一個”(a、an)、“所述”(the)時，它們都包括該名詞的復(fù)數(shù)形式。

要注意的是，在本申請書和權(quán)利要求中所使用的術(shù)語“包括”不應(yīng)當(dāng)被解釋為限定于其后所列的內(nèi)容，它并不排除其它的元件或步驟。

在本發(fā)明中，術(shù)語“抗體”指抗體及其功能性衍生物例如Fab片段、ScFv和僅含重鏈的抗體。

“捕獲分子”是結(jié)合其它分子的分子。捕獲分子的實(shí)例有親和體(affibody)、抗體、受體分子、適體和螯合劑。

抗獨(dú)特型抗體被定義為針對抗體或T細(xì)胞受體的序列的抗原特異性部分并因此識別其他抗體或T細(xì)胞受體的抗原結(jié)合位點(diǎn)的抗體或其它結(jié)合分子。通常，抗獨(dú)特型抗體特異于一類抗體或源自單一物種的抗體。合適的其它結(jié)合分子的實(shí)例有親和體和DNA適體。優(yōu)選使用抗獨(dú)特型抗體。

在本發(fā)明中，特異性結(jié)合靶的抗體是在競爭性檢測中與靶分子更強(qiáng)或更優(yōu)先地結(jié)合但顯示出很少的或不顯示與其他分子的交叉反應(yīng)性的抗體。

對范圍廣泛的特異性結(jié)合靶的抗體具有較廣的特異性或結(jié)合親和力的捕獲分子例如是選自與抗體的Fc部分結(jié)合的蛋白A或蛋白G。