[發(fā)明專利]包含顆粒佐劑和免疫增強劑組合的流感疫苗

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680047609.8
• 申請日: 2006-11-06
• 公開（公告）號: CN101370515A
• 公開（公告）日: 2009-02-18
• 發(fā)明（設計）人: R·拉普奧里;D·奧黑根;G·德爾古迪斯
• 申請（專利權）人: 諾華疫苗和診斷有限公司
• 主分類號: A61K39/145
• 分類號: A61K39/145;A61K39/39
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 陶家蓉

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技術領域

本發(fā)明屬于用佐劑配制疫苗來提供保護以抵御流感病毒感染的領域。

背景技術

除了希龍疫苗公司(Chiron?Vaccines)的FLUAD^TM產(chǎn)品利用MF59水包油乳液佐劑外[1]，目前常規(guī)使用的流感疫苗不包含佐劑。參考文獻2的第17和18章詳細描述了這些疫苗。它們基于活病毒或滅活的病毒，滅活疫苗可以基于完整的病毒、“裂解”病毒或純化的表面抗原(包括血凝素和神經(jīng)氨酸酶)。血凝素(HA)是滅活流感疫苗的主要免疫原，參考HA水平標準化疫苗劑量，疫苗通常含有約15μg?HA/毒株。

流感爆發(fā)期需要大量流感疫苗，但難以增加疫苗供應從而滿足巨大的需求。因此，除了生產(chǎn)更多疫苗抗原，有人提出可以使用較低含量的抗原/毒株，同時使用佐劑來彌補減少的抗原劑量。還有人提出在流行間期采用相同的方案，從而例如能覆蓋更多人群而無需提高生產(chǎn)水平。

有人提示可用不可溶的顆粒佐劑[3]，例如鋁鹽[4-7]或微粒[8]改進流感疫苗。雖然這些佐劑配制的疫苗是有用的，但仍有提高的空間。因此，本發(fā)明的目的是提供佐劑配制的其它改進流感疫苗(對于流行期和流行間期使用)和它們的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容

現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含有不可溶顆粒佐劑的流感疫苗能引發(fā)IgG應答，主要是TH2應答(IgG1)。通過在組合物中加入免疫增強劑可將該應答改變?yōu)門H1應答(IgG2a)。據(jù)報道，TH1型應答[9]能提高針對流感病毒的異源亞型(heterosubtypic)免疫力。有利的是，還發(fā)現(xiàn)免疫增強劑能提高血凝素滴度和抗-血凝素ELISA滴度。

因此，本發(fā)明提供包含(i)流感病毒抗原；(ii)不可溶的顆粒佐劑；和(iii)免疫增強劑的免疫原性組合物。

本發(fā)明還提供制備免疫原性組合物的方法，其包括混合(i)流感病毒抗原；(ii)不可溶的顆粒佐劑；和(iii)免疫增強劑的步驟。

本發(fā)明提供裝有以下組分的試劑盒：(i)包含流感病毒抗原的第一試劑盒組分；和(ii)包含不可溶顆粒佐劑的第二試劑盒組分，其中(a)所述第一和第二組分包含免疫增強劑，或(b)所述試劑盒裝有包含免疫增強劑的第三試劑盒組分。

流感病毒抗原

本發(fā)明組合物包含流感病毒抗原。通常可從流感病毒顆粒制備這些抗原，或者可在重組宿主(例如，利用桿狀病毒載體的昆蟲細胞)中表達諸如血凝素等抗原并以純化形式使用[10、11]。然而，抗原一般來自病毒顆粒。

抗原可采用活病毒，或者更優(yōu)選滅活病毒的形式。滅活病毒的化學方法包括用有效量的一種或多種以下試劑處理：洗滌劑、甲醛、福爾馬林、β-丙內(nèi)酯或紫外光。滅活的其它化學方法包括用亞甲基藍、補骨脂素、羧基富勒烯(C60)或它們?nèi)魏蔚慕M合處理。本領域知道滅活病毒的其它方法，例如二元乙胺(binary?ethylamine)、乙?；蚁﹣啺坊颚蒙渚€。INFLEXAL^TM產(chǎn)品是完整的病毒顆粒滅活疫苗。

如果使用滅活病毒，疫苗可包含完整的病毒、裂解病毒或純化的表面抗原(包含血凝素，通常還包含神經(jīng)氨酸酶)。

可通過各種方法從含病毒的液體收集病毒顆粒。例如，純化方法可包括利用線性蔗糖梯度溶液的區(qū)帶離心，所述蔗糖溶液含有洗滌劑以使病毒顆粒破裂。任選稀釋后，可通過滲濾純化抗原。