[發明專利]酶促制備香茅醛的方法

有效

• 申請號: 200680046937.6
• 申請日: 2006-12-19
• 公開（公告）號: CN101331233A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發明（設計）人: A·沙德勒;T·弗里德里希;R·施蒂默爾;S·林克－楊科
• 申請（專利權）人: 巴斯夫歐洲公司
• 主分類號: C12P7/24
• 分類號: C12P7/24;C12N9/02
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所
• 代理人: 黃革生;林柏楠

本發明涉及從α，β-不飽和醛類制備旋光飽和醛類或醇類的酶促方法， 尤其是制備香茅醛的方法。

發明背景

(R)-(+)香茅醛是重要的化學中間體，其例如可用于制備薄荷醇。

化學法制備(R)-(+)香茅醛，始于檸檬醛，需要非常復雜的方法(隔絕氧 和水)，這導致工業合成的成本很高。

發明目的

目的是提供通過對應選擇性還原檸檬醛制備香茅醛的方法，該方法提 供了高化學產率且擁有最大對映體純度的香茅醛。

發明描述

本發明涉及在烯醇還原酶的存在下通過還原從式(1)的α，β-不飽和醛類 制備式(2)的旋光飽和醛類或醇類的過程。所述烯醇還原酶

(i)具有多肽序列SEQ?ID?No.1或2，或

(ii)具有與SEQ?ID?No.1或2的序列至少80％同一的多肽序列。

其中，R1和R2分別獨立地為H、C₁-C₄-烷基，R3為H、C₁-C₆-烷基 或烯基，以支鏈和直鏈形式。

本發明方法可使用式(1)的α，β-不飽和醛類實現，在所述式1中R1和 R2分別獨立地為H、支鏈和直鏈形式的C₁-C₄-烷基，R3為H、支鏈和直 鏈形式的C₁-C₆-烷基或烯基。烷基和烯基可以是單或多取代的。

本發明的方法特別適宜的底物是式(1)的那些α，β-不飽和醛類，其中R1 為H，R2為CH₃且R3為-CH₂-CH₂-CH＝(CH₃)₂(順式或反式檸檬醛)；以 及其中R1為CH₃，R2為H且R3為CH₃(2-甲基-戊-2-烯-1-醛)的那些。

本發明所采用的烯醇還原酶，偶爾且在某種程度上，也會除了將羰基 官能團的α，β位中的雙鍵還原之外，還原所述羰基官能團自身，以在該情 況中產生相應的醇。

適用于本發明方法的烯醇還原酶，是能夠在NADPH依賴的反應中將 2-甲基-戊-2-烯-1-醛還原以提供(S)-2-甲基-戊烷-1-醛的酶。該反應在下文中 也被稱作模式反應。

此外，本發明方法中適合的烯醇還原酶具有如SEQ?ID?No.1或No.2 的多肽序列，或與SEQ?ID?No.1或2的序列為至少80％、優選至少90％、 特別優選至少95％、以及尤其是至少97％、98％或99％同一的多肽序列。

具有SEQ?ID?No.1的多肽是來自貝克酵母菌中的QYE2基因(釀酒酵母 (Saccharomyces?cerevisiae)基因座YHR179W)。

具有SEQ?ID?No.2的多肽是來自貝克酵母菌中的QYE3基因(釀酒酵母 基因座YPL171C)。

為了本文描述的目的，序列同一性由威斯康星大學(University?of Wisconsin)遺傳計算機組(Genetics?Computer?Group，GCG)的計算機程序 “GAP”確定，采用10.3版本和GCG推薦的標準參數。