[發(fā)明專利]用于分化干細(xì)胞的方法及其在牙病治療中的用途

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200680044909.0
• 申請(qǐng)日: 2006-09-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101316926A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-12-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: K·歐瑟;C·克勞森;K·R·派德森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)制基因股份公司
• 主分類號(hào): C12N5/06
• 分類號(hào): C12N5/06;A61K6/00
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 羅菊華

1.用于繁殖和/或分化哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方法，該方法包括將哺乳動(dòng)物細(xì)胞暴露于或與一種或多種牙周韌帶組織、來(lái)源于牙周韌帶組織的牙周韌帶蛋白質(zhì)或因子共培養(yǎng)，從而獲得具有PDL特征并達(dá)到至少一種下列狀況的細(xì)胞：

i)顯示出通過(guò)Von?Kossa方法所證明的牙周特征，在該方法中磷酸鈣沉積物被染成棕色至黑色，

ii)顯示出增加的骨橋蛋白和骨鈣蛋白以及同時(shí)減少的骨唾液蛋白(骨唾液蛋白II或BSP)，

iii)能夠被植入以修復(fù)和/或再生牙周組織，

iv)能夠通過(guò)朝向牙齒的齦線的愈合來(lái)修復(fù)病癥例如牙周炎，也稱為牙周病或齒根骨膜炎，和

v)被宿主接受而無(wú)顯著的免疫反應(yīng)或細(xì)胞排斥。

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述哺乳動(dòng)物細(xì)胞在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中繁殖，然后通過(guò)將生長(zhǎng)培養(yǎng)基變換為分化培養(yǎng)基例如骨誘導(dǎo)性培養(yǎng)基而被誘導(dǎo)分化，由此收獲具有獲得的PDL特征的細(xì)胞。

3.權(quán)利要求1或2的方法，其中所述哺乳動(dòng)物細(xì)胞是哺乳動(dòng)物間充質(zhì)細(xì)胞、來(lái)源于臍帶和/或臍帶血的同種異體哺乳動(dòng)物間充質(zhì)細(xì)胞、自體哺乳動(dòng)物間充質(zhì)細(xì)胞、自體哺乳動(dòng)物成骨細(xì)胞或成骨細(xì)胞的前體細(xì)胞/祖細(xì)胞，其中這些細(xì)胞通過(guò)暴露于牙周韌帶蛋白將分化成PDL細(xì)胞。

4.權(quán)利要求3的方法，其中進(jìn)行繁殖的哺乳動(dòng)物間充質(zhì)細(xì)胞是自體間充質(zhì)細(xì)胞，并且所獲得的細(xì)胞能夠原位轉(zhuǎn)分化成PDL細(xì)胞或顯示出PDL特征的細(xì)胞。

5.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所獲得的具有PDL特征的細(xì)胞是HLA-DR陽(yáng)性的(HLA-DR+)、Lin陽(yáng)性的(Lin+)、Thy-1陽(yáng)性的(Thy-1+)、Stro-1陽(yáng)性的(Stro-1+)、CD-13陽(yáng)性的、CD-44陽(yáng)性的、CD-90陽(yáng)性的、CD-73陽(yáng)性的，和可能CD146/MUC?18陽(yáng)性的，但對(duì)于CD?31是陰性的。

6.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所獲得的具有PDL特征的細(xì)胞是CD-34陰性的。

7.具有PDL特征并且通過(guò)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所描述的方法可獲得的細(xì)胞群。

8.用于治療牙周組織中的病癥的方法，所述方法包括將通過(guò)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所定義的方法而獲得的細(xì)胞直接向下注射至牙周韌帶，從而導(dǎo)致所述細(xì)胞與周圍牙根管的粘著。

9.權(quán)利要求8的方法，其中細(xì)胞的植入采用細(xì)胞和支架的組合。

10.主要由能夠誘導(dǎo)PDL細(xì)胞特征的牙周韌帶蛋白質(zhì)組成的組織組合物，該組合物可通過(guò)下列方式而獲得：在培養(yǎng)基中培養(yǎng)牙周韌帶外植體以獲得細(xì)胞的遷移，并收獲這些細(xì)胞。

11.在權(quán)利要求10中描述的細(xì)胞，所述細(xì)胞能夠與來(lái)源于來(lái)自自體或同種異體供體的骨髓細(xì)胞或其集落的哺乳動(dòng)物細(xì)胞共培養(yǎng)，暴露于或與牙周韌帶組織、來(lái)源于牙周韌帶組織的牙周韌帶蛋白質(zhì)或因子共培養(yǎng)，并通過(guò)這些因子進(jìn)行誘導(dǎo)以

a.獲得牙周特征，其顯示出增加的骨橋蛋白和骨鈣蛋白以及減少的骨唾液蛋白，

b.能夠被植入以修復(fù)和/或再生牙周組織，

c.能夠被植入以修復(fù)和/或再生牙周組織，

d.能夠修復(fù)病癥，例如牙周炎，也稱為牙周病，

e.被宿主接受而無(wú)顯著的免疫反應(yīng)或細(xì)胞排斥。