[發明專利]用于用具有改善的免疫原性的PRRSV抗原免疫接種動物的方法和組合物

無效

• 申請號: 200680040532.1
• 申請日: 2006-08-30
• 公開（公告）號: CN101300363A
• 公開（公告）日: 2008-11-05
• 發明（設計）人: I·H·安薩利;F·A·奧索里奧;A·K·派特奈克
• 申請（專利權）人: 內布拉斯加大學董事會
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 羅菊華

1.在豬中引發針對豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)抗原的改善 的免疫應答的方法，其包括施用包含編碼低糖基化的PRRSV?GP5多肽變 體的多核苷酸的組合物，從而引發所述豬針對PRRSV抗原的改善的免疫 應答，在所述變體中相應于在SEQ?ID?NO：1的參考GP5蛋白中的天冬 酰胺34或天冬酰胺51的至少一個N-聯糖基化位點被失活。

2.權利要求1的方法，其中所述多核苷酸包括感染性PRRSV?RNA 分子。

3.權利要求1的方法，其中所述多核苷酸包括編碼感染性PRRSV?RNA 分子的DNA分子。

4.權利要求2或權利要求3的方法，其中所述感染性PRRSV?RNA 分子是北美PRRSV衍生物或歐洲PRRSV衍生物。

5.權利要求2的方法，其中所述感染性PRRSV?RNA分子是編碼低 糖基化的PRRSV?GP5多肽變體蛋白的北美PRRSV衍生物，在所述變體蛋 白中相應于在SEQ?ID?NO：1的參考GP5蛋白中的天冬酰胺34或天冬酰 胺51的至少一個N-聯糖基化位點被失活。

6.權利要求5的方法，其中相應于在SEQ?ID?NO：1中的天冬酰胺 51的N-聯糖基化位點被失活。

7.權利要求5的方法，其中相應于在SEQ?ID?NO：1的參考GP5蛋 白中的天冬酰胺34和天冬酰胺51的2個所述N-聯糖基化位點均被失 活。

8.權利要求7的方法，其中2個所述N-聯糖基化位點通過用編碼 除天冬酰胺外的氨基酸的密碼子替換編碼所述天冬酰胺34和所述天冬 酰胺51的密碼子而被失活。

9.權利要求8的方法，其中所述編碼另一種氨基酸的密碼子編碼 丙氨酸或谷氨酰胺殘基。

10.權利要求9的方法，其中所述密碼子編碼丙氨酸殘基。

11.權利要求1的方法，其中所述多核苷酸包括DNA分子，在所述 DNA分子中將在哺乳動物細胞中具有活性的啟動子與編碼低糖基化的 GP5蛋白的所述多核苷酸有效地連接。

12.權利要求11的方法，其中所述啟動子是CMV啟動子。

13.權利要求1的方法，其中所述N-聯糖基化位點通過用編碼除天 冬酰胺外的氨基酸的密碼子替換編碼所述天冬酰胺51的密碼子而被失 活。

14.權利要求13的方法，其中所述編碼另一種氨基酸的密碼子編 碼丙氨酸或谷氨酰胺殘基。

15.權利要求1的方法，其中相應于天冬酰胺34的所述N-聯糖基 化位點通過用編碼除天冬酰胺外的氨基酸的密碼子替換編碼所述天冬 酰胺34的密碼子而被失活。

16.權利要求15的方法，其中所述編碼另一種氨基酸的密碼子編 碼丙氨酸或谷氨酰胺殘基。

17.權利要求1的方法，其中所述多核苷酸編碼低糖基化的PRRSV GP5多肽變體蛋白，在所述變體蛋白中相應于在SEQ?ID?NO：1的參考 GP5蛋白中的天冬酰胺34和天冬酰胺51的2個所述N-聯糖基化位點均 被失活。

18.權利要求17的方法，其中2個所述N-聯糖基化位點通過用編 碼除天冬酰胺外的氨基酸的密碼子替換編碼所述天冬酰胺34和所述天 冬酰胺51的密碼子而被失活。

19.權利要求18的方法，其中所述編碼另一種氨基酸的密碼子編 碼丙氨酸或谷氨酰胺殘基。

20.權利要求17的方法，其中所述N-聯糖基化位點之一通過用編 碼除天冬酰胺外的氨基酸的密碼子替換編碼所述天冬酰胺34或所述天 冬酰胺51的一個密碼子而被失活。

21.權利要求1的方法，其中所述組合物通過皮下注射、靜脈內注 射、皮內注射、腸胃外注射、肌內注射、無針注射、電穿孔、口服遞送、 鼻內遞送、口鼻遞送、或其任何組合來施用。