[發明專利]用于琥珀酸鹽之生長關聯性生產的方法和生物

無效

• 申請號: 200680038408.1
• 申請日: 2006-09-08
• 公開（公告）號: CN101300356A
• 公開（公告）日: 2008-11-05
• 發明（設計）人: A·P·布加德;S·J·萬殿
• 申請（專利權）人: 基因組股份公司
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12P19/02;G01N33/50
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 趙蓉民

1.非天然微生物中包含一個或多個基因中斷，而此基因中斷 發生在對一種酶進行編碼的基因中，這種酶會在其活性被上述基因中 斷降低時，將琥珀酸鹽的生產與微生物生長專向關聯起來，因而此基 因中斷可以將穩定的琥珀酸鹽之生長關聯性生產傳遞給此非天然微生 物。

2.對于第1條權利要求中的非天然微生物，其上述一個或多 個基因中斷包括表1中列出的代謝路徑改造。

3.對于第1條權利要求中的非天然微生物，其上述一個或多 個基因中斷包括上述一個或多個基因的缺失。

4.對于第1條權利要求中的非天然微生物，其中的非天然微 生物選自經表1中所列之代謝路徑改造的微生物組。

5.對于第1條權利要求中的非天然微生物，其微生物可包括 細菌、酵母或真菌。

6.對于第5條權利要求中的非天然微生物，上述細菌可以是 E.coli，A.succiniciproducens，A.succinogenes，M. succiniciproducens，R.etli，Bacillus?subtilis， Cotynebacterium?glutamicum，Gluconobacter?oxydans，Zymomonas mobilis，Lactococcus?lactis，Lactobacillus?plantarum， Streptomyces?coelicolor，Clostridium?acetobutylicum， Pseudomonas?fluorescens和Pseudomonas?putida中的一種。

7.對于第5條權利要求中的非天然微生物，上述酵母可以是 Saccharomyces?cerevisiae，Schizosaccharomyces?pombe， Kluyveromyces?lactis，Klvyveromyces?marxianus，Aspergillus terreus，Aspergillus?niger和Pichiapastoris中的一種。

8.一種非天然微生物，它包含一組將琥珀酸鹽生產與微生物 生長專向關聯起來的代謝路徑改造，而這組代謝路徑改造由以下基因 組合中選擇的一個或多個基因中斷組成：

(a)adhE，ldhA

(b)adhE，ldhA，ackA-pta

(c)pfl，ldhA

(d)pfl，ldhA，adhE

(e)ackA-pta，pykF，atpF，sdhA

(f)ackA-pta，pykF，ptsG，或

(g)ackA-pta，pykF，ptsG，adhE，ldhA，

或其直系同源基因，其中上述微生物表現出穩定的琥珀酸鹽之生 長關聯性生產。

9.對于第8條權利要求中的非天然微生物，其基因可對進一 步包含pykA、atpH、sdhB或dhaKLM中至少一個基因中斷的代謝路 徑改造(e)ackA-pta，pykF，atpF，sdhA進行編碼。

10.對于第8條權利要求中的非天然微生物，其基因可對進一 步包含pykA或dhaKLM中至少一個基因中斷的代謝路徑改造(f) ackA-pta，pykF，ptsG進行編碼。

11.對于第8條權利要求中的非天然微生物，其基因可對進一 步包含pykA或dhaKLM中至少一個基因中斷的代謝路徑改造(g) ackA-pta，pykF，ptsG，adhE，ldhA進行編碼。

12.對于第8條權利要求中的非天然微生物，上述一個或多個 基因的中斷包含基因的缺失。

13.對于第8條權利要求中的非天然微生物，其微生物可包括 細菌、酵母或真菌。