[發明專利]測定SARS病毒核衣殼蛋白的測定方法、測定用試劑盒、試驗器具、SARS病毒核衣殼蛋白單克隆抗體及其產生上述單克隆抗體的雜交瘤

無效

• 申請號: 200680037843.2
• 申請日: 2006-10-11
• 公開（公告）號: CN101283093A
• 公開（公告）日: 2008-10-08
• 發明（設計）人: 藤本幸太郎;梶田忠宏;武田和彥;岡本尚
• 申請（專利權）人: 希森美康株式會社
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C07K16/08;C12N5/10;C12N15/02;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/545;G01N33/569;G01N33/577
• 代理公司: 北京金之橋知識產權代理有限公司
• 代理人: 梁朝玉

技術領域：

本發明涉及測定SARS病毒核衣殼蛋白(SARS-NP)的測定方法、測定用試劑盒及試驗器具。本發明還涉及針對SARS-NP的單克隆抗體及其產生上述單克隆抗體的雜交瘤。

背景技術：

嚴重急性呼吸系統綜合癥(Severe?Acute?Respiratory?Syndrome：SARS)是近年才發現的傳染病，已確認SARS的起因病原體是分類為冠狀病毒科的新型病毒(SARS病毒)。作為感染SARS的診斷方法，已經有利用免疫學測定方法檢測標本中的SARS病毒。其中一例有非專利文獻1和非專利文獻2所記述的方法。

非專利文獻1記述了用針對SARS-NP的多克隆抗體進行酶聯免疫測定(ELISA)的測定方法。具體而言，將多克隆抗體固定在ELISA的酶標板上，在此依次添加標本和已標記多克隆抗體，形成復合物，并檢測之。

非專利文獻2則記述了用針對SARS-NP的單克隆抗體和針對SARS-NP的多克隆抗體進行ELISA法測定的測定方法。具體而言，將三種單克隆抗體固定在ELISA的酶標板上，在此依次添加標本和已標記多克隆抗體，形成復合物，并檢測之。

非專利文獻1和非專利文獻2所記述的方法均為ELISA。一般來說，ELISA被稱為免疫學測定方法中靈敏度較高的測定方法。另一方面，在病毒診斷中，便捷的免疫層析法也經常得到利用。然而，免疫層析法是比ELISA靈敏度低的測定方法，即使將非專利文獻1和非專利文獻2所記述的多克隆抗體和單克隆抗體用于免疫層析法，也可能無法得到足夠的靈敏度。

非專利文獻1：Susanna?K.P.Lau，Patrick?C.Y.Woo，Beatrice?H.L.Wong，Hoi-Wah?Tsoi，Gibson?K.S.Woo，Rosana?W.S.Poon，Kwok-Hung?Chan，William?I.Wei，J.S.Malik?Peiris，and?Kwok-Yung?Yuen，《酶聯免疫檢測法檢測嚴重急性呼吸系統綜合癥(SARS)患者中的SARS冠狀病毒核衣殼蛋白(Detection?of?Severe?Acute?Respiratory?Syndrome(SARS)Coronavirus?Nucleoc?apsid?Protein?in?SARS?Patients?by?Enzyme-Linded?Immunosorbent?Assay)》，Journal?of?Clinical?Microbiology，Vol.42，No.7，P.2884-2889.

非專利文獻2：Xiao-yan?Che，Li-wen?Qiu，Yu-xian?Pan，Kun?Wen，Wei?Hao，Li-ya?Zhang，Ya-di?Wang，Zhi-yong?Liao，Xu?Hua，Vincent?C.C.Cheng，and?Kwok-yung?Yuen，《從嚴重急性呼吸系統綜合癥患者檢測核衣殼蛋白抗原用基于高靈敏度特異性單克隆抗體的捕捉酶免疫測定(Sensitive?and?Specific?Monoclonal?Antibody-Based?Capture?Enzyme?Immunoassay?for?Detection?of?Nucleocapsid?Antigen?in?Sera?from?Patients?sith?Severe?Acute?Respiratory?Syndrome)》，Journal?of?Clinical?Microbiology，Vol.42，No.6，P.2629-2635.

發明內容：

本發明要解決的課題

本發明的目的是提供一種比傳統方法靈敏度高的測定方法及測定用試劑盒、試驗器具、單克隆抗體和產生單克隆抗體的雜交瘤，使之在SARS-NP的測定中，不僅可以應用于免疫學測定方法中靈敏度較高的ELISA測定方法，也可以應用于免疫學測定方法中靈敏度較低的免疫層析法。

解決課題的手段

鑒于上述課題，本發明提供一種SARS-NP測定方法，該方法是利用與SARS病毒核衣殼蛋白(SARS-NP)特異性結合的第一抗體和與SARS-NP特異性結合的第二抗體測定SARS-NP，上述第一抗體或上述第二抗體是能識別位于SARS-NP氨基酸序列的N端起第283～第422的區域(C區域)的表位的抗體。