[發(fā)明專(zhuān)利]包括SORF構(gòu)建體的多基因表達(dá)和使用多蛋白、前體蛋白和蛋白酶解的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200680034979.8
• 申請(qǐng)日: 2006-07-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101595228A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·R·卡森;W·吉安;J·G·薩爾費(fèi)爾德;J·古;D·A·雷吉爾;Y·庫(kù)尼斯
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 艾博特公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P21/06
• 分類(lèi)號(hào): C12P21/06;C12P21/04;C12N15/00;C07H21/02;C07H21/04
• 代理公司: 中國(guó)專(zhuān)利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉 健;李連濤

1.用于產(chǎn)生一個(gè)或多個(gè)重組蛋白產(chǎn)物的包括sORF插入片段的表 達(dá)載體；所述sORF插入片段包括編碼第一個(gè)多肽的第一個(gè)核酸序列， 編碼第一個(gè)蛋白裂解位點(diǎn)的第一個(gè)插入核酸序列，和編碼第二個(gè)多肽 的第二個(gè)核酸序列；其中將編碼所述第一個(gè)蛋白裂解位點(diǎn)的所述插入 核酸序列可操縱地置于所述第一個(gè)核酸序列和所述第二個(gè)核酸序列之 間；并且其中所述表達(dá)載體能夠表達(dá)在所述第一個(gè)蛋白裂解位點(diǎn)可裂 解的sORF多肽。

2.權(quán)利要求1的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)蛋白裂解位點(diǎn)包括自 我加工裂解位點(diǎn)。

3.權(quán)利要求1或2的表達(dá)載體，其中所述自我加工裂解位點(diǎn)包括 蛋白內(nèi)含子片段或修飾的蛋白內(nèi)含子片段，其中修飾的蛋白內(nèi)含子片 段允許所述第一個(gè)多肽和所述第二個(gè)多肽的裂解但不容許所述第一個(gè) 多肽和所述第二個(gè)多肽的完全連接。

4.權(quán)利要求1或2的表達(dá)載體，其中所述自我加工裂解位點(diǎn)包括 hedgehog片段或修飾的hedgehog片段，其中修飾的hedgehog片段允 許所述第一個(gè)多肽與所述第二個(gè)多肽的裂解。

5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中第一個(gè)多肽和第二個(gè)多 肽能夠多亞基裝配。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽和第二 個(gè)多肽中的至少一個(gè)能夠胞外分泌。

7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽和第二 個(gè)多肽中的至少一個(gè)是哺乳動(dòng)物來(lái)源的。

8.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽和第二 個(gè)多肽中的至少一個(gè)包括免疫球蛋白重鏈或其功能片段。

9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽和第二 個(gè)多肽中的至少一個(gè)包括免疫球蛋白輕鏈或其功能片段。

10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽包括免 疫球蛋白重鏈或其功能片段，并且所述第二個(gè)多肽包括免疫球蛋白輕 鏈或其功能片段；并且其中所述第一個(gè)和第二個(gè)多肽是任何次序的。

11.權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽和第 二個(gè)多肽合起來(lái)能夠以多亞基裝配來(lái)結(jié)合，形成功能片段或其他抗原 識(shí)別分子。

12.權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)多肽是所 述第二個(gè)多肽的上游。

13.權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第二個(gè)多肽是所 述第一個(gè)多肽的上游。

14.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的表達(dá)載體，進(jìn)一步包括編碼第三個(gè)多 肽的第三個(gè)核酸序列，其中將所述第三個(gè)核酸序列可操縱地置于所述 第二個(gè)核酸序列之后；并且其中所述第三個(gè)序列可以獨(dú)立地與所述第 一個(gè)或第二個(gè)核酸序列中的任一個(gè)相同或不同。

15.權(quán)利要求14的表達(dá)載體，其中所述第一個(gè)、第二個(gè)和第三個(gè) 多肽中的至少兩個(gè)合起來(lái)能夠以多亞基裝配來(lái)結(jié)合。

16.權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)的表達(dá)載體，進(jìn)一步包括編碼第二個(gè)蛋 白裂解位點(diǎn)的第二個(gè)插入核酸序列，其中將所述第二個(gè)插入核酸序列 可操縱地置于所述第一個(gè)和所述第二個(gè)核酸序列之后；并且其中所述 第二個(gè)插入序列可以與所述第一個(gè)插入核酸序列相同或不同。

17.權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的表達(dá)載體，進(jìn)一步包括編碼第三個(gè)多 肽的第三個(gè)核酸序列，和編碼第二個(gè)蛋白裂解位點(diǎn)的第二個(gè)插入核酸 序列；其中第二個(gè)插入核酸序列和第三個(gè)核酸序列以該次序可操縱地 置于所述第二個(gè)核酸序列之后。

18.權(quán)利要求1-17任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第三個(gè)核酸序列 編碼免疫球蛋白重鏈、輕鏈或各自的功能片段。

19.權(quán)利要求14-18任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第三個(gè)核酸序列 編碼免疫球蛋白輕鏈或其功能片段。

20.權(quán)利要求14-18任一項(xiàng)的表達(dá)載體，其中所述第三個(gè)核酸序列 編碼免疫球蛋白重鏈或其功能片段。