[發(fā)明專利]制造脂質(zhì)體的系統(tǒng)和方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680034313.2
• 申請日: 2006-07-27
• 公開（公告）號: CN101267805A
• 公開（公告）日: 2008-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 伊恩·麥克拉克倫;勞埃德·B·杰夫斯;愛德華·亞沃爾斯基;基尤·拉姆
• 申請（專利權(quán)）人: 普洛體維生物治療公司
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/7088;A61K38/00;A61K38/43;A61K39/00;A61K47/44;A61K48/00
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司
• 代理人: 王旭

相關(guān)申請的交叉參考

本申請是要求于2005年7月27日遞交的題目為“制造脂質(zhì)體的系統(tǒng) 和方法(SYSTEMS?AND?METHODS?FOR?MANUFACTURING LIPOSOMES)”的美國申請?zhí)?0/703,380的利益的非臨時申請，將其通過 參考全部結(jié)合于此。

發(fā)明背景

已經(jīng)知道許多用于將活性物質(zhì)施用到細胞中的系統(tǒng)，諸如脂質(zhì)體、納 米顆粒、聚合物顆粒、免疫-和配體-復(fù)合體以及環(huán)糊精(參見，抗微生物 和抗癌化學(xué)治療中的藥物轉(zhuǎn)運(Drug?Transport?in?antimicrobial?and anticancer?chemotherapy).C.Papadakou編，CRC出版社，1995)。脂質(zhì)體典 型地在實驗室中通過聲處理、洗滌劑透析、乙醇注射或稀釋、French壓力 擠出(French?press?extrusion)、醚輸注和反相蒸發(fā)制備而成。已知具有多個 雙層的脂質(zhì)體是多層脂質(zhì)囊(multilamellar?lipid?vesicles，MLVs)。由于捕獲 在層間的流體只在每層膜降解時釋放，所以MLVs是延時釋放藥物的候 選。已知具有單一雙層的脂質(zhì)體是單層脂質(zhì)囊(UV)。UVs可以制成小的 (SUVs)或大的(LUVs)。

上述用于脂質(zhì)體生產(chǎn)的一些方法利用可以導(dǎo)致磷脂原材料和包封的 藥物變性的苛刻的或極端的條件。另外，這些方法對于大量脂質(zhì)體的大規(guī) 模生產(chǎn)不容易縮放(scalable)。此外，通過常規(guī)乙醇稀釋形成脂質(zhì)囊涉及 將脂質(zhì)注射或逐滴加入到水性緩沖劑中。這樣得到的囊典型地在大小上不 均勻，并且含有單層和多層囊的混合物。

將常規(guī)脂質(zhì)體配制成攜帶包含在水性內(nèi)部空間(水溶性藥物)或參與 脂質(zhì)雙層(水不溶性藥物)的治療劑。在血流中具有短半衰期的活性劑特 別適合通過脂質(zhì)體遞送。例如，已知許多抗腫瘤藥在血流中具有短半衰期， 以致它們的腸胃外應(yīng)用是不可行的。然而，經(jīng)由血流用于活性劑的部位特 異性遞送的脂質(zhì)體的應(yīng)用受到網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的細胞將脂質(zhì)體從血液 中快速清除的嚴重限制。

美國專利號5,478,860，其于1995年12月26日授予Wheeler等，并 且通過引用結(jié)合于此，公開了用于遞送疏水性化合物的微乳組合物。這樣 的組合物具有許多用途。在一個實施方案中，所述疏水性化合物是包含藥 物的治療劑。該專利還公開體外和體內(nèi)遞送疏水性化合物到細胞的方法。

Knopov等的PCT公布WO01/05373，其通過引用結(jié)合于此，公開了 用提供湍流環(huán)境(例如，雷諾數(shù)＞2000)的靜態(tài)混合器(static?mixer)利 用乙醇注射-型方法制備脂質(zhì)囊的技術(shù)。然后，可以在囊形成之后負載治 療劑。

公布的美國申請2004/0142025，其通過引用結(jié)合于此，公開了使用順 序的逐步稀釋方法形成脂質(zhì)顆粒的技術(shù)。所公開的方法在非湍流的攪拌環(huán) 境中產(chǎn)生具有低于200nm的大小的脂質(zhì)顆粒。然而，所公開的方法傾向 于產(chǎn)生不太最佳的囊大小和低于最佳的均勻性，特別是對于包封siRNA 的脂質(zhì)體。此外，對于包封的質(zhì)粒，需要酸性緩沖溶液。

盡管在美國專利號5,478,860，US20040142025和WO?05373中公開的 進展，還存在對于用于配制和生產(chǎn)脂質(zhì)囊，特別是包封治療劑諸如核酸的 脂質(zhì)囊的改進的方法和裝置的需要。本發(fā)明實現(xiàn)了這些及其它需要。

發(fā)明概述

本發(fā)明提供用于制備任選地包含治療劑的脂質(zhì)囊的方法和裝置。所述 治療劑可以包括，例如，蛋白質(zhì)、核酸、反義核酸、藥物等。本發(fā)明可以 用于形成包含包封的核酸或小分子藥物的脂質(zhì)囊。在一方面，脂質(zhì)囊在低 壓下快速制備，并且方法是完全可以縮放的。在某些優(yōu)選的實施方案中， 所述方法不包括靜態(tài)混合器或?qū)ｉT的擠出設(shè)備。

按照一個實施方案，本發(fā)明提供用于生產(chǎn)脂質(zhì)體的方法。所述方法典 型地包括，在第一儲蓄器(reservoir)中提供水溶液，所述第一儲蓄器與 第二儲蓄器中的有機脂質(zhì)溶液流體連通，并且將所述水溶液與所述有機脂 質(zhì)溶液在第一混合區(qū)域混合以產(chǎn)生脂質(zhì)體溶液。有機脂質(zhì)溶液與所述水溶 液混合，以便基本上瞬時產(chǎn)生包封治療產(chǎn)品的脂質(zhì)體。而后立即將該脂質(zhì) 體溶液與緩沖溶液混合，以產(chǎn)生稀釋的脂質(zhì)體溶液。可以將所述脂質(zhì)體溶 液引入到緩沖溶液儲蓄器中，或者所述脂質(zhì)體溶液可以與緩沖劑在第二混 合區(qū)域中混合。