[發明專利]T細胞受體和編碼該受體的核酸

有效

• 申請號: 200680033634.0
• 申請日: 2006-09-07
• 公開（公告）號: CN101287831A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發明（設計）人: 珠玖洋;日淺厚則;奧村悟司;直田浩明;宮原慶裕
• 申請（專利權）人: 國立大學法人三重大學;寶生物工程株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;A61K35/12;A61K35/76;A61K38/00;A61K48/00;A61P35/00;C07K14/725;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 龐立志;劉玥

技術領域

本發明涉及構成MAGE-A4_143-151肽特異性的、HLA-A2402限制性T細胞受體(TCR)α鏈的多肽、編碼該多肽的核酸、構成上述TCR的β鏈的多肽、編碼該多肽的核酸、由上述構成α鏈的多肽與構成β鏈的多肽構成的T細胞受體、含有上述核酸的重組核酸、含有該重組核酸的載體、導入了上述核酸或載體的細胞、以及含有上述載體或細胞作為有效成分的抗癌藥。

背景技術

細胞毒性T細胞(CTL)中有可通過特異性的T細胞受體(T?cellreceptor，以下簡稱為TCR)識別由主要組織相容性抗原基因復合體(Major?histocompatibility?gene?compler，以下簡稱為MHC)編碼的主要組織相容性抗原分子(MHC分子，為人時，稱為人白細胞抗原(humanleukocyte?antigen)，以下簡稱為HLA)與抗原肽的結合物——復合體，殺傷在細胞表面呈遞該復合體的細胞的細胞。因此，該細胞毒反應成立必須是1)有CTL存在，該CTL具有對靶細胞的HLAI類類型特異性的TCR，2)有抗原肽存在，該抗原肽與HLA分子結合形成的復合體可被TCR識別。

上述抗原肽例如是在哺乳類細胞內合成的抗原等在細胞質中加工，分解成小的肽而產生，并且與HLA分子締合，呈遞于細胞表面。即，在由很多亞單元構成的蛋白酶體復合體中，蛋白質被分解為含有8-15個氨基酸的肽，其中的幾個通過TAP轉運蛋白從細胞質中運輸到內質網中。這些肽如果在內質網中與I類/β2微球蛋白的雜二聚體結合，則形成三分子復合體，較穩定，通過高爾基體轉運到細胞表面。表達腫瘤相關抗原或腫瘤特異性抗原蛋白的腫瘤細胞應該可以將被T細胞識別的HLA限制性抗原肽呈遞于細胞表面。

已知HLA?I類分子主要有HLA-A、-B、-C，與它們結合并呈遞的抗原肽含有8-10個氨基酸，并且根據各個HLA分子的不同而具有不同的一定的結構上的特征。例如，與世界上頻率最高的HLA-A2.1分子結合的肽最為已知的是自N末端第2號為Leu、且C末端具有Leu或Val的含9-10個氨基酸的肽。與以日本人為代表的亞洲人種中較多的HLA-A24分子結合的肽最為已知的是自N末端第2號為Tyr、Phe、Met、Trp其中之一，且C末端具有Leu、Ile、Trp、Phe其中之一的含有9-10個氨基酸的肽。

目前，抗原肽已經得到鑒別的腫瘤抗原有：與HLA-A1結合的MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A4，與HLA-A2.1結合的MAGE-A3、MART1、酪氨酸酶、gp100、HER2/neu、CEA等，與HLA-Cw1結合的MAGE-A3，與HLA-B44結合的MAGE-A3，與HLA-B37結合的MAGE-A4，與HLA-A24結合的MAGE-A1、MAGE-A2、MAGE-A3、MAGE-A4、NY-ESO-1、CEA、HER2/neu、酪氨酸酶、β-連環蛋白(Catenin)等。其中的大部分是首先將識別腫瘤細胞的I類限制性CTL進行株化，鑒定該CTL所識別的腫瘤抗原，接著通過遺傳工程學方法發現腫瘤抗原蛋白中的最小單位，再以與HLA?I類分子結合的基序相關的信息為基礎，發現最小單位中的肽。或者首先以與上述HLA?I類分子結合的肽中共通的基序結構為基礎，發現腫瘤抗原蛋白中的HLAI類分子結合肽，接著利用抗原呈遞細胞選擇可誘導CTL的抗原肽，最后通過確認對腫瘤細胞具有毒性的CTL是否被誘導來確定抗原肽。

HLA?I類分子被分成幾個亞型，其保守亞型的種類在人種之間有很大差異，世界上HLA-A2最多，白色人種的45％是HLA-A2陽性。該HLA-A2限制性抗原肽的鑒定發展最快。在日本人中，HLA-A2陽性占40％，觀察其亞型則與白色人種相同，HLA-A^*0201陽性為20％，其余的大多是A^*0206陽性。與這些亞型結合的肽不同，主要研究的HLA-A2是HLA-A^*0201。在日本人中，HLA-A24陽性占60％以上，亞洲人種與其它人種相比，HLA-A24陽性率高。因此，HLA-A24限制性抗原肽的發現對于亞洲人種、特別是日本人，在通過誘導特異性地作用于腫瘤細胞的CTL、提供對腫瘤治療有用的CTL方面顯示重要作用。