[發明專利]用于改良生產天冬氨酸衍生的氨基酸及化學品的改變的乙醛酸支路

無效

• 申請號: 200680030255.6
• 申請日: 2006-06-20
• 公開（公告）號: CN101365797A
• 公開（公告）日: 2009-02-11
• 發明（設計）人: J·N·德里亞;S·W·喬丹
• 申請（專利權）人: 阿徹－丹尼爾斯－米德蘭公司
• 主分類號: C12P13/20
• 分類號: C12P13/20;C12P13/04;C12P13/06
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 羅菊華

1.通過發酵生產L-氨基酸產品的方法，包括(a)在發酵培養基 中培養細菌，其中所述細菌產生所述L-氨基酸并且含有重組核酸構建 體，該構建體具有使得至少一種選自由aceBAK操縱子中的基因和glcB 基因組成的組的基因在所述細菌中過表達的可操作配置；(b)在發酵 培養基和細菌中的至少一種中富集所述L-氨基酸；和(c)從發酵培養 基和細菌中的至少一種中分離所述L-氨基酸。

2.權利要求1的方法，其中所述細菌是大腸桿菌(Escherichia coli)菌株。

3.權利要求1的方法，其中所述重組核酸包含可操作地連接在所 述至少一種基因上游的啟動子序列，該啟動子序列對于所述aceBAK 操縱子或glcB基因是非天然的。

4.權利要求3的方法，其中所述啟動子選自：tac啟動子、trc 啟動子、1ac啟動子、trp啟動子、λ-P_L啟動子、λ-P_R啟動子、1acUV5 啟動子、araBAD啟動子、1pp啟動子和1pp-1ac啟動子。

5.權利要求3的方法，其中所述至少一種基因選自：aceB、aceA 和glcB。

6.權利要求3的方法，其中所述非天然啟動子替代所述aceBAK 操縱子和glcB基因中的至少一個的天然啟動子，并且其中所述天然啟 動子被缺失或間斷。

7.權利要求3的方法，其中插入所述非天然啟動子而不造成所述 aceBAK操縱子和glcB基因中的至少一個的天然啟動子的缺失。

8.權利要求1的方法，其中僅所述至少一種基因在所述細菌中過 表達。

9.權利要求1的方法，其中所述L-氨基酸選自：L-蘇氨酸、L- 異亮氨酸、L-高絲氨酸、L-賴氨酸和L-甲硫氨酸。

10.包含重組核酸的細菌，其中所述重組核酸具有使至少一種選 自由aceBAK操縱子中的基因和glcB基因組成的組的基因在所述細菌 中過表達的可操作配置。

11.權利要求10的細菌，其中所述細菌是大腸桿菌菌株。

12.權利要求10的細菌，其中所述重組核酸包含可操作地連接在 所述至少一種基因上游的啟動子序列，該啟動子序列對于所述aceBAK 操縱子或glcB基因是非天然的。

13.權利要求12的細菌，其中所述非天然啟動子選自：tac啟動 子、trc啟動子、1ac啟動子、trp啟動子、λ-P_L啟動子、λ-P_R啟動 子、1acUV5啟動子、araBAD啟動子、1pp啟動子和1pp-1ac啟動子。

14.權利要求12的細菌，其中所述aceBAK操縱子的天然啟動子 被該非天然啟動子替代。

15.權利要求12的細菌，其中在所述aceBAK操縱子中插入所述 非天然啟動子而不置換或間斷所述aceBAK操縱子的天然啟動子。

16.權利要求13的細菌，其中所述glcB基因的天然啟動子被所 述非天然啟動子替代。

17.權利要求13的細菌，其中所述非天然啟動子與所述glcB基 因可操作地連接而不替代與所述glcB基因可操作地連接的天然啟動 子。

18.選自具有如下保藏號的菌株及其衍生物的細菌菌株： NRRLB-30843、NRRLB-30844、NRRLB-30845、NRRLB-30846、 NRRLB-30847、NRRLB-30848、NRRLB-30849、NRRLB-30850和 NRRLB-30851。